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第一部分重楼总皂苷对人肝癌HepG2细胞增殖作用影响的研究目的:观察重楼总皂苷对人肝癌HepG2细胞增殖作用的影响;方法:以不同浓度重楼总皂苷处理人肝癌HepG2细胞,分别培养不同时间后用CCK8法检测人肝癌Hep G2细胞的增殖情况;结果:CCK8法检测不同浓度重楼总皂苷作用于人肝癌HepG2细胞不同时间段后的细胞增殖情况,结果显示,重楼总皂苷对人肝癌HepG2细胞有增殖抑制作用。而且在实验所设置的药物浓度范围内,随着药物浓度的增加、药物作用时间的延长,对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制率逐渐升高。用重楼总皂苷处理24h、48h、72h后的IC50值（半数抑制浓度）分别为（90.38±0.27）ug/ml、（59.84±0.38）ug/ml、（48.62±0.32）ug/ml;结论:在实验所设置的药物浓度范围内,重楼总皂苷能抑制人肝癌HepG2细胞的细胞增殖,而且其抑制率随着药物浓度的增加、持续时间的延长而增高,呈现出浓度和时间依赖性。第二部分重楼总皂苷对人肝癌HepG2细胞放射敏感性影响的研究目的:探讨重楼总皂苷对人肝癌HepG2细胞放射敏感性的影响及可能机制;方法:1.取对数生长期的人肝癌HepG2细胞,清洗消化后分别设置空白对照组、单纯药物组、单纯照射组、照射+药物组四组。空白对照组:用正常培养液继续培养48h;单纯药物组:用加入含一定浓度重楼总皂苷（IC20=25ug/ml）的培养液继续培养48h;单纯照射组:用正常培养液继续培养48h后,再采用6MV的X线进行细胞照射,照射剂量设置为8GY;照射+药物组:先用加入含一定浓度重楼总皂苷（IC20=25ug/ml）的培养液培养48h后,再采用6MV的X线进行细胞照射,照射剂量设置为8GY。照射完成后再继续培养各组细胞12h,所有操作完成后再利用流式细胞术分别检测各组肝癌细胞的细胞凋亡情况及细胞周期分布变化;2.取对数生长期的人肝癌HepG2细胞,清洗消化后分别设置空白对照组、单纯药物组、单纯照射组、照射+药物组四组。空白对照组:用正常培养液再分别继续培养肿瘤细胞48h、72h;单纯药物组:用加入含一定浓度重楼总皂苷（IC20=25ug/ml）的培养液分别继续培养肿瘤细胞48h、72h;单纯照射组:先用正常培养液分别继续培养肿瘤细胞48h、72h,再分别采用6MV的X线进行细胞照射,照射剂量设置为8GY;照射+药物组:先用加入含一定浓度重楼总皂苷（IC20=25ug/ml）的培养液分别继续培养肿瘤细胞48h、72h,再分别采用6MV的X线进行细胞照射,照射剂量设置为8GY。照射完成后再继续培养各组细胞12h,所有操作完成后再采用蛋白免疫印迹法（western blot）检测各组肝癌细胞中MUC-1蛋白的表达情况、实时荧光定量PCR法（RT-PCR）检测各组肝癌细胞中MUC-1 mRNA的表达情况。结果:1.流式细胞术检测各组中人肝癌HepG2细胞的周期分布情况,结果显示低细胞毒性浓度的重楼总皂苷（25ug/ul）作用人肝癌HepG2细胞48h后,肿瘤细胞周期分布情况发生变化,G0/G1期细胞分布减少,而S期细胞明显增多,其差异均具有统计学意义（P<0.05）;同时,重楼总皂苷也可以适量增加G2/M期细胞分布情况,但统计结果无明显差异（P>0.05）;而在完成X线照射后,处于G2/M期的人肝癌HepG2明显减少,统计结果具有差异（P<0.05）,而G0/G1期及S期的肿瘤细胞均不同程度的增加,但统计结果无明显差异（P>0.05）。2.流式细胞术检测各组中人肝癌HepG2细胞的细胞凋亡情况结果显示,低细胞毒性浓度的重楼总皂苷（25ug/ul）作用人肝癌HepG2细胞48h后,细胞早期和晚期的凋亡率均显著增加,其结果具有统计学意义（P<0.001）;而低细胞毒性的重楼总皂苷（25ug/ul）可协同X线进一步诱导人肝癌HepG2细胞发生细胞凋亡,其早期凋亡率和晚期凋亡明显增加,实验结果具有统计学意义（P<0.05）。3.Western Blot法检测MUC-1蛋白的表达情况结果显示,低细胞毒性浓度的重楼总皂苷（25ug/ul）及X线均能抑制人肝癌HepG2细胞中MUC-1蛋白的表达,并呈现出时间依赖性,其结果具有统计学意义（P<0.001）;而当重楼总皂苷与X线联合应用,则能进一步抑制人肝癌HepG2细胞中MUC-1蛋白的表达,结果具有统计学意义（P<0.001）;说明重楼总皂苷具有协同X线抑制MUC-1蛋白表达的作用。4.RT-PCR法检测MUC-1 mRNA的表达情况结果可知,低细胞毒性浓度的重楼总皂苷（25ug/ul）及X线均能抑制人肝癌HepG2细胞中MUC-1mRNA的表达,并呈现出时间依赖性,其结果具有统计学意义（P<0.001）;而当重楼总皂苷与X线联合应用时,则可以进一步抑制人肝癌HepG2细胞中MUC-1 mRNA的表达,结果具有统计学意义（P<0.001）;说明重楼总皂苷具有协同X线抑制MUC-1 mRNA表达的作用。其结果与Western Blot法检测MUC-1蛋白的表达结果相一致。结论:低细胞毒性浓度的重楼总皂苷（25ug/ul）对人肝癌HepG2细胞具有一定的放射增敏作用,其机制可能与抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡,降低人肝癌HepG2细胞中MUC-1蛋白的表达有关,而与调节肿瘤细胞周期变化可能无明显关系。