熊的胆、肉、骨、皮等均可入药。因此黑熊除具有观赏价值外，还有较高的经济价值，也正是因为它具有较高的经济价值，导致种群数量急剧下降。已经被列为国家重点保护的二类野生动物。　　亚洲黑熊(Ursus thibetanus)，别名狗熊、黑瞎子，东北地区分布在黑龙江、沈阳、吉林的长白山，分类地位动物界→脊索动物门→哺乳纲→真兽亚纲→食肉目→熊科→黑熊。近年来乱砍滥伐日益严重，曾经分布很广的熊类栖息地变成孤立的小区，导致种群的分离，尤其长白山地区栖息地消失最严重，亚洲黑熊基因和种质保种迫在眉睫。　　本研究分为两个部分：第一部分为组织块法和酶法结合建立黑熊耳部成纤维细胞系。包括原代培养，细胞纯化，传代培养液的选择，生长曲线的绘制等。　　第二部分为以亚洲黑熊成纤维细胞作为供核细胞，以延边黄牛MII期去核的卵母细胞作为受体，以挤压法去核，注入体细胞到卵黄周隙中，采用不同的融合电场强度、脉冲次数、脉冲时程对熊-牛克隆胚胎进行融合，复合化学方法激活。结果以融合率、卵裂率、4-细胞发育率、8-细胞发育率、16-细胞发育率和囊胚发育率计。结果如下：　　1.通过组织块法+酶法培养，成功获得亚洲黑熊成纤维细胞系。　　2.对纯化后的第三代成纤维细胞进行群体倍增实验，根据前后细胞密度的变化，通过计算，结果确定适合黑熊成纤维细胞系传代的培养液血清浓度为10％.　　3.通过绘制生长曲线研究了黑熊耳皮肤成纤维细胞的增殖规律，用 DMEM培养黑熊耳部成纤维细胞，传代后滞留期较短，约有一天左右，活细胞逐渐贴壁生长。此后进入对数生长期，延续六天左右。第八天细胞发生接触抑制而开始死亡，细胞数量进入平台期，维持三天左右，细胞逐渐脱落死亡，细胞数量有所下降；　　4.使用1100 v／cm的融合电场后，16-细胞发育率为34.89%显著高于其他三组（P<0.05）。　　5.使用2次融合脉冲后，8-细胞发育率61.31%显著高于其他两组（P<0.05）。　　6.脉冲时程为40μs时，4-细胞发育率75%显著高于10μs时（P<0.05）；8-细胞发育率53.89%显著高于20μs（P<0.05）。　　使用SPSS14.0软件对结果进行方差分析多重比较后，综合考虑实验结果和方便操作时间与过程，得出以下结论：适宜熊-牛克隆胚胎融合的电场强度为1100 v／cm，脉冲次数为2次，脉冲时程为40μs。