【摘 要】
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黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）污染范围广且具有很强的毒性作用,严重危害到人类和动物健康,采取有效的脱毒措施成为亟须解决的问题。益生菌不仅具有很好的益生效果还具有较强的脱毒功能,已成为极具发展潜力的霉菌毒素脱毒剂。本研究从益生菌菌株中成功筛选出脱毒功能强、益生性能优的枯草芽胞杆菌菌株,并对其脱毒特性进行研究、脱毒效果进行验证,为研发脱毒型动物微生态制剂提供理论与技术支撑,为畜牧
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黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）污染范围广且具有很强的毒性作用,严重危害到人类和动物健康,采取有效的脱毒措施成为亟须解决的问题。益生菌不仅具有很好的益生效果还具有较强的脱毒功能,已成为极具发展潜力的霉菌毒素脱毒剂。本研究从益生菌菌株中成功筛选出脱毒功能强、益生性能优的枯草芽胞杆菌菌株,并对其脱毒特性进行研究、脱毒效果进行验证,为研发脱毒型动物微生态制剂提供理论与技术支撑,为畜牧业的健康可持续发展提供保障。1、益生菌菌株的筛选及鉴定以香豆素为唯一碳源对实验室保藏的42株益生菌菌株进行初筛,筛选出可在AFB1环境下存活的优势菌株;以AFB1为底物,通过ELISA方法进行脱毒复筛,筛选出3株脱毒性能优的菌株;通过对其生物学特性（生长曲线、抑菌性能、耐受性能）的综合评估,成功筛选到脱毒功能强、益生性能优的HDR-02为目的菌株;通过形态学观察、生化指标鉴定、16S r RNA鉴定,鉴定HDR-02为枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）。2、目的菌株的脱毒特性研究研究结果如下:（1）不同时间点对脱毒效果的影响。脱毒时间越长对AFB1的脱毒率越高。（2）不同p H对脱毒效果的影响。在p H值2～9条件下脱毒率无明显变化。（3）不同组分对脱毒效果的影响。HDR-02菌株灭活菌悬液对AFB1的脱毒能力最强,脱毒率达到87.1%,活菌悬液次之,发酵液上清和胞内物对AFB1的脱毒率较低。（4）评估菌体-AFB1复合物的稳定性。评估表明菌体-AFB1复合物具有很高的稳定性。结果提示,脱毒率与脱毒时间有关但与p H无关;HDR-02的胞外产物可以降解AFB1;灭活菌悬液的结果排除了HDR-02菌体通过生物代谢脱毒的假设,表明HDR-02的菌体通过紧密吸附AFB1的方式脱毒。3、动物试验验证效果动物试验方案:A组（空白对照组）;B组（益生菌组）;C组（益生菌+AFB1攻毒组）;D组（AFB1攻毒组）。分别在第7天和第10天采样,评价各组各期雏鸭生产性能、血清生化指标、肝脏病理变化,分析动物试验效果。各组各期雏鸭的生产性能结果表明,灌服HDR-02能显著提高未攻毒组雏鸭的体重和平均日增重（P<0.05）,提高雏鸭的生产性能;AFB1攻毒显著降低雏鸭体重、平均日增重（P<0.05）,甚至引起雏鸭死亡;灌服HDR-02菌悬液能降低AFB1中毒雏鸭死亡率,显著缓解AFB1中毒对雏鸭体重、平均日增重的影响（P<0.05）。血清生化指标结果表明,益生菌组雏鸭的血清生化指标与空白对照组相比无显著差异（P>0.05）;AFB1攻毒组雏鸭的血清生化指标中ALT、AST指标显著高于空白对照组（P<0.05）,而HDR-02的添加可以显著缓解这一现象（P<0.05）。肝脏切片观察发现,HDR-02菌株和饲养管理不会对雏鸭的肝脏组织结构造成损伤;AFB1破坏雏鸭肝脏组织结构,导致脂肪变性、炎性细胞浸润、胆小管增生等病理学变化;HDR-02菌株的添加能缓解AFB1对雏鸭肝脏组织结构的破坏。以上结果表明HDR-02既可以发挥益生作用,提高雏鸭的生产性能;又可以发挥脱毒作用,有效缓解AFB1对雏鸭的损伤。
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