白桦BpTCP7基因的功能研究

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:a734266739
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
TCP转录因子是一类植物特有的转录因子,TCP家族成员属于螺旋-环-螺旋转录因子(bHLH)超家族成员,参与叶片和花器官的发育、维管束后生木质部导管分子的分化和形成、下胚轴形成、顶端优势等生物过程,且参与细胞分裂素、茉莉酸甲酯、生长素及油菜素内酯等激素的合成途径及应答,在植物的生长发育过程中发挥着重要作用。本研究通过分析BpTCP7基因的时空表达、启动子组织表达特性及转基因白桦的表型观测,探索BpTCP7基因的功能,研究结果如下:(1)根据白桦45个转录组数据库,获得了15条白桦BpTCP基因,分别命名为BpTCP1-BpTCPl5,其中BpTCP5为部分序列,其余14条为全长序列。通过实时荧光定量PCR的方法对15条白桦BpTCP基因进行表达模式分析,这15条基因在白桦的顶芽、嫩叶、嫩茎、雌花及雄花中均有表达,各基因之间的表达模式存在差异,也有相似之处,在顶芽、叶片和雄花中表达量相对较高,在8月中旬的叶片中相对表达量最高。(2)根据白桦基因组信息,克隆了BpTCP7基因上游1791 bp的启动子序列,并对其顺式作用元件进行了分析,构建proBpTCP7::GUS的植物表达载体,将其遗传转化入拟南芥,通过组织化学染色检测该启动子的组织表达特性,结果表明:该启动子序列中含有与组织部位表达、激素、胁迫应答等相关的顺式作用元件;通过GUS染色发现,该基因在拟南芥的营养生长阶段和生殖生长阶段均有表达,转基因拟南芥中出现剑形不规则叶片,且在不规则叶片中的表达很明显。(3)应用Gateway技术构建白桦BpTCP7基因的植物过表达及抑制表达载体,分别采用根瘤农杆菌介导的叶盘法和合子胚法进行白桦的遗传转化,并获得了4个过表达转化子和3个抑制表达转化子。通过PCR和qPCR鉴定过表达转基因植株,结果表明,白桦BpTCP7基因已经成功整合到了过表达植株基因组上,并且转基因植株的BpTCP7基因表达水平远高于非转基因对照植株。(4)对过表达转基因植株进行0.8%NaCl和20%PEG的胁迫处理,测定不同胁迫处理条件下不同株系的受害指数及SOD活性、MDA和H202含量的变化。结果表明,与非转基因株系相比,转基因株系在逆境胁迫条件下,表现出更高的抗逆能力。(5)将BpTCP7基因亚克隆至pGBKT7载体,形成BD-TCP7重组质粒,并以之为诱饵蛋白表达载体筛选白桦酵母双杂交cDNA文库。经过酵母双杂交筛选以及回转验证实验,选出了1种与BpTCP7相互作用的蛋白质。对所筛选出的蛋白质进行保守结构域分析发现:该蛋白(TCP10)属于TCP家族成员。
其他文献
10根牙签,预防牙疾把10根牙签用橡皮筋扎成一束,轻戳患侧皮肤。此法在《黄帝内经》中称之为“毛刺”。注意不要损伤肌肤,而是有节奏地轻轻地戳,并且可扩大到耳朵、双颊部分。可防牙周炎。  吹风机暖风,五十肩可愈“五十肩”即肩周炎,常发生在五十岁左右。可用吹风机(稍大型为好)。开始时,用大风力,风口必须离患部20~30厘米以防烫伤。要不时晃动,使整个肩膀呈赤红色为止。然后把风力调小,不必晃动,集中热力在
地被菊花(Ground cover Chrysanthemum)是菊花(Chrysanthemum morifolium)中的一个品种群,具有植株低矮、生长旺盛、分枝性强、冠幅大而整齐、花色艳丽等特点,在城市园林绿化
黄檗(Phellodendron amurense Rupr.)是芸香科阔叶乔木,在我国主要分布在北方地区。由于传统中药和现代制药的需求,野生黄檗资源遭到严重的破坏,目前已经被列为国家二级保护植物。以往的研究报道,黄檗遭受虫害侵袭严重,林木的正常生长受到影响。因此,对黄檗防御机制的研究尤为重要,目前对黄檗药用成分的研究报道较多,但从化学生态学及植物生理学角度研究性别、树龄、健康状况、空间位置及生长