目的探讨人脐带间质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSC）的分离培养及其生物学特性。开展hUCMSC慢病毒转基因抗肿瘤的初步研究。方法采用组织块贴壁培养方法获得hUCMSC，并对其进行体外培养，应用PKH26和二咪基苯基吲哚（DAPI）染色方法进行形态学观察；应用流式细胞术测定细胞周期及表面抗原特征FITC-CD34，CD71，HLA-DR，PE-CD29，CD38，CD44，CD105和HLA-Ⅰ；染色体遗传分析及绘制生长曲线；利用地塞米松、维生素C、β-磷酸甘油、bFGF和地塞米松、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素、消炎痛诱导第3代hUCMSC分别向成骨细胞和脂肪细胞分化，并通过碱性磷酸酶（ALP）、Von Kossa和油红O染色进行检测；通过PCR，RT-PCR等方法检测相关基因的表达。构建融合基因TNFα-Tumstatin的慢病毒载体，采用磷酸钙转染方法转染293T细胞和hUCMSC，通过PCR，RT-PCR，ELISA，³H-TdR检测融合基因及其蛋白的表达，观察抑制肿瘤生长的效果。结果hUCMSC在培养了两周后，大多呈纤维状生长，细胞传至第2代时，则为均一的长梭形细胞。在经PKH26和DAPI染色后，可见细胞有一个蓝色的平滑的核，胞浆呈红色，并可维持20天左右。在传代4个月后（约26代），细胞仍然保持了其生物学特性。流式分析显示：CD29，CD44，CD95，CD105，HLA-Ⅰ表达阳性，CD34，CD38，CD71，HLA-DR不表达。染色体核型正常。第3代细胞周期分析显示：G₀／G₁，G₂／M和S期分别为88.86％，5.69％和5.45％。经过体外诱导，ALP、Von Kossa和油红O染色均呈不同程度的阳性，RT-PCR结果显示，诱导后的细胞分别表达了骨形成蛋白-3（BMP-3）和过氧化物酶体增殖体激活受体γ2（PPAR_γ2）等基因。hUCMSC还表达了骨髓MSC所表达的BMI-1和nucleostemin基因。成功构建融合基因TNFα-Tumstatin的慢病毒载体，包装293T细胞后可见绿色荧光，转染效率可达50％以上，在转化293T和hUCMSC后，基因组中可检测到融合基因，表明转染成功。慢病毒上清中可以检测到融合蛋白的表达并且对肿瘤细胞U937（人髓系白血病细胞株）具有抑制作用。结论HUCMSC具有与骨髓MSC相似的生物学特性，尤其具有向成骨细胞和成脂肪细胞分化的多潜能性特点。hUCMSC的慢病毒转基因抗肿瘤的研究已取得初步进展，在转基因治疗肿瘤中具有重要的前景，将成为基因治疗和组织工程中一种新的间质干细胞来源。