论文部分内容阅读
目的：采用免疫组化法测定兔KOA关节软骨细胞中MMP-1、TIMP-1表达的影响，探讨自拟新方康健关节葆对关节软骨修复和保护的可能机制，并阐明该药在改善关节功能和保护关节软骨等方面的作用，为临床治疗KOA提供实验及其理论依据。 方法：1.分组、造模：成年健康新西兰大白兔50只，雌、雄各半，按体重从轻到重进行编号，并随机分成5组。A：空白组，B：模型组，C：氨基葡萄糖组（西药对照组）， D：壮骨关节丸组（中药对照组）、 E：康健关节葆组（实验组），每组10只。所有实验的新西兰大白兔在同等条件下饲养一周，无其它不适后，进行造模，除空白组外，余组用4%木瓜蛋白酶0.1ml右膝关节腔内注射，4周后建立兔右膝骨关节炎模型，是目前常用的造模方式。 2.给药方法：在常规喂养一周后，开始造模、给药，A组（空白组）：不造模，生理盐水20ml，二次/日，10ml/次，灌服。B组（模型组）：只造模，生理盐水20ml，二次/日，10ml/次，灌服。C组（氨基葡萄糖组）：氨基葡萄糖液20ml（0.06g/ml）/日，二次/日，10ml/次，灌服。D组（壮骨关节丸组）：壮骨关节丸水溶液20ml（0.07g/ml）/日，二次/日，10ml/次，灌服。E组（康健关节葆组）：康健关节葆水溶液20ml（0.07g/ml）/日，二次/日，10ml/次，灌服。 3.取材及检测：在实验动物造模4周结束后，分别取各组兔膝关节软骨，行大体肉眼观察、HE染色观察及免疫组化法测定MMP-1、TIMP－1的含量变化，行统计学分析。 结果：1.从实验动物的解剖后，肉眼大体观察显示，模型组兔膝关节软骨具有明显的退行性改变，符合造模的要求，康健关节葆能很好的缓解关节软骨破坏，且比其它对照组效果显著。2.HE染色后光学显微镜观察及兔关节软骨细胞 MMP-1、TIMP-1免疫组化显示：康健关节葆组的 MMP-1表达较模型组明显降低，P<0.01有显著性差异。康健关节葆组的 TIMP－1表达较模型组升高，P<0.05有统计学意义。由此可以说明康健关节葆能降低关节软骨MMP－1的表达水平，对TIMP-1的表达有升高作用，从而延缓或减慢软骨基质的降解、促进软骨修复。 结论：康健关节葆能显著降低OA模型兔关节软骨中MMP-1含量，且对TIMP-1据有升高作用，以减慢及延缓兔膝关节炎中软骨的破坏或降解，能起到改善关节功能的作用。这可能是该药修复受损软骨和保护未受损的软骨机制之一。为康健关节葆在临床治疗OA提供了理论依据。