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[目的]通过体外细胞水平和体内动物水平实验探讨葡萄籽原花青素(GSP)对缺血性急性肾衰的预防保护作用,并对其可能机制进行初步研究。
[方法]细胞水平:以293T细胞为实验对象,细胞分为5组:空白组、过氧化氢刺激模型组、GSP高浓度(800μg/ml)预给药组、GSP中浓度(200μg/ml)预给药组、GSP低浓度(50μg/ml)预给药组。GSP预给药组分别加入相应浓度的GSP预孵育,空白组和模型组加入等体积的培养基。预孵育1h后,模型组、GSP预给药各组分别加入400μM过氧化氢,空白组加入等体积的培养基。孵育5h后测定细胞活力,丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢酶(CAT)等指标。动物水平:健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组:假手术组、缺血再灌注组、阳性药卡托普利组、GSP预处理组。GSP预处理组大鼠采用GSP200mg·kg-1·d-1灌胃处理,阳性药组大鼠采用卡托普利2.5mg·kg-1·d-1灌胃处理,假手术组、缺血再灌注组大鼠均采用10ml/kg生理盐水灌胃处理,各组均1次/天,连续给药7天。缺血再灌注组、阳性药卡托普利组、GSP预处理组大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉后,同时阻断双侧肾动脉60min,再灌注24h建立大鼠缺血性急性肾衰竭的动物模型。假手术组不夹闭肾动脉,其他操作同模型组。于肾脏恢复血流24小时后取血和肾组织标本,检测血清尿素氮(BUN)、血肌配(Scr)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO),肾脏作HE染色观察病理变化。
[结果]细胞水平:GSP各浓度预给药组能够显著提高过氧化氢刺激下的293T相对细胞活力(P<0.01),同时也可以显著降低细胞上清液中的MDA与LDH(P<0.01)。GSP高浓度与中浓度组亦可以显著提高细胞的CAT活力(P<0.01)。动物水平:假手术组肾脏结构基本正常,缺血再灌注组可见明显肾小管上皮细胞肿胀、坏死、脱落及炎性细胞浸润。与缺血再灌注组相比较,GSP预处理组可以显著降低血清BUN、Scr(P<0.01),血清LDH及NO水平(P<0.05)。
[结论]葡萄籽原花青素对过氧化氢刺激下的293T细胞具有良好的保护作用,对大鼠肾缺血性急性肾衰亦具有良好的预防保护作用,其作用机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化等有关。