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目的:从国内不同厂家IVIg制品中筛选出抗可溶性Aβ抗体含量较高的IVIg,再通过亲和层析分离纯化出此制品中的抗可溶性Aβ抗体,从而为使用国产IVIg防治阿尔茨海默病提供实验支撑。 方法:1. 利用人工合成的Aβ通过三种不同的方法合成Aβ寡聚体,再通过SDS-PAGE对制备好的寡聚体进行鉴定,从而筛选出较优的合成方法。2. 通过透析、超滤以及凝胶过滤层析等方法去除Aβ寡聚体中混杂的Aβ单体。3. 通过间接ELISA检测国内7个不同厂家不同批次IVIg制品中抗Aβ抗体的含量,从中筛选出抗体含量较高的IVIg制品。4. 将可溶性Aβ偶联到微珠上,IVIg上样,进行亲和层析,从而分离纯化出抗Aβ抗体。然后再通过ELISA和SDS-PAGE对纯化出的抗体做出初步鉴定。 结果:1. 使用第二种方法合成Aβ寡聚体效果较好,不仅含有低分子量的,还含有高分子量的,而且寡聚体含量也较高。2. 透析、超滤以及凝胶过滤层析等方法都无法将Aβ单体和寡聚体分离开来。3. 厂家7的IVIg制品中抗Aβ抗体的含量较高。4. 所获得抗Aβ抗体回收率为21.1%、比活为9671.9ng/mg、提纯倍数为248。还原型的IVIg蛋白条带主要集中在50 Kd附近以及16-36Kd之间,而还原型抗Aβ抗体蛋白条带主要集中在50 Kd附近。 结论:国内不同厂家IVIg制品中的抗可溶性Aβ抗体含量差别较大;使用离心柱法亲和层析可从国产IVIg制品中分离纯化出抗可溶性Aβ抗体。