从国产IVIg制品中分离纯化抗Aβ抗体初探

来源 :北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:thebestsolutions
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:从国内不同厂家IVIg制品中筛选出抗可溶性Aβ抗体含量较高的IVIg,再通过亲和层析分离纯化出此制品中的抗可溶性Aβ抗体,从而为使用国产IVIg防治阿尔茨海默病提供实验支撑。  方法:1. 利用人工合成的Aβ通过三种不同的方法合成Aβ寡聚体,再通过SDS-PAGE对制备好的寡聚体进行鉴定,从而筛选出较优的合成方法。2. 通过透析、超滤以及凝胶过滤层析等方法去除Aβ寡聚体中混杂的Aβ单体。3. 通过间接ELISA检测国内7个不同厂家不同批次IVIg制品中抗Aβ抗体的含量,从中筛选出抗体含量较高的IVIg制品。4. 将可溶性Aβ偶联到微珠上,IVIg上样,进行亲和层析,从而分离纯化出抗Aβ抗体。然后再通过ELISA和SDS-PAGE对纯化出的抗体做出初步鉴定。  结果:1. 使用第二种方法合成Aβ寡聚体效果较好,不仅含有低分子量的,还含有高分子量的,而且寡聚体含量也较高。2. 透析、超滤以及凝胶过滤层析等方法都无法将Aβ单体和寡聚体分离开来。3. 厂家7的IVIg制品中抗Aβ抗体的含量较高。4. 所获得抗Aβ抗体回收率为21.1%、比活为9671.9ng/mg、提纯倍数为248。还原型的IVIg蛋白条带主要集中在50 Kd附近以及16-36Kd之间,而还原型抗Aβ抗体蛋白条带主要集中在50 Kd附近。  结论:国内不同厂家IVIg制品中的抗可溶性Aβ抗体含量差别较大;使用离心柱法亲和层析可从国产IVIg制品中分离纯化出抗可溶性Aβ抗体。
其他文献
染色质沉默在维持植物基因组稳定和调控基因表达方面发挥着重要作用,而植物可以通过DNA甲基化和组蛋白的修饰来实现染色质沉默。ROS1(Repressor ofsilencing1)是拟南芥中的一
学位
采用多相分类方法对分离自中国温带地区和亚热带地区胡枝子的88个根瘤菌菌株进行了分类。采用的多相分类方法包括表型性状测定及其数值分类、ARDRA(16S rDNAPCR-RFLP)、全细
鸡的品种改良具有十分重要的生产意义。鸡解偶联蛋白基因是影响鸡生产性状的重要基因,它所编码的解偶联蛋白(uncoupling proteins,UCP)的主要功能是使呼吸链氧化过程与ADP磷酸
本试验于2005~2006在河南师范大学小麦试验田进行,选用冬小麦品种郑州9023为试验材料,开展室内盆栽试验、露天盆栽试验,研究了八种修复剂对As胁迫下小麦生长发育的影响,并对小麦成
华北落叶松是冀北山区的主要造林树种,华北落叶松人工林在木材生产、防风固沙、涵养水源、保持水土等方面发挥着重要的作用。冀北山地土壤理化性质的变化将会直接影响到该地区
文昌鱼(Amphioxus)是介于无脊椎动物和脊椎动物之间的过渡类型,是研究动物进化和胚胎发育的典型材料。利用分子生物学手段,研究文昌鱼有关基因的结构、进化和表达,可以揭示文昌
背景缺血性脑血管病(Ischemic cerebrovascular disease,ICVD)是威胁人类健康的重要疾病,虽然既往研究识别了多种危险因素,但是仍有许多缺血性脑血管病人不能用已知危险因素解释
酵母菌(Yeast)是一类有着重要经济价值的真菌,在地球表面分布极广。它们中的绝大多数是腐生菌(Saprophytes),在生物工业方面有着重要的作用。酵母菌因为有很强的发酵力而引起人
本文成功克隆了河豚IL-4 cDNA全序列,并在毕赤酵母系统中诱导表达了重组IL-4。河豚IL-4 cDNA:全长834bp,包括39bp的5非编码区(5UTR),375bp的3非编码区(3UTR)和420bp的开放阅读框