【摘 要】
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本试验分为高羊茅再生体系的建立和农杆菌介导遗传转化体系的建立两部分试验。再生体系的建立以“猎狗5号”、“上农矮生高羊茅” 和“98-19” 3份高羊茅品种为供试材料,成熟
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本试验分为高羊茅再生体系的建立和农杆菌介导遗传转化体系的建立两部分试验。再生体系的建立以“猎狗5号”、“上农矮生高羊茅” 和“98-19” 3份高羊茅品种为供试材料,成熟种子胚为外植体,在MS基本培养基上分别添加不同2,4-D诱导浓度,2,4-D分别与BA、NAA不同配比进行愈伤组织诱导与分化试验。探讨各种激素对高羊茅愈伤组织诱导、分化的影响。结果表明:2,4-D浓度对愈伤组织的诱导起决定性作用,9mg/L为较佳诱导浓度。在2,4-D浓度为9mg/L时,三个品种的愈伤组织诱导率达到最高。
高羊茅的转化体系的建立,以农杆菌C58pMP90(PBI121)为供试菌株,以成熟胚诱导的愈伤组织作为受体,利用农杆菌介导法将已克隆的与植物的耐旱、耐盐有关的胆碱氧化酶基因,CMO,导入猎狗5号、上农矮生高羊茅、98-19三个高羊茅品系。通过对农杆菌侵染过程中的影响因素菌液浓度和侵染时间进行条件优化,提高农杆菌转化愈伤组织的效率。研究结果显示,适宜的菌液OD600 值为0.6左右,在该浓度下,感染时间控制在10~15min之间。用这种方法转化三个供试品种,几个高羊茅品种的愈伤组织转化率从高到低依次为:猎狗5号34.68%,98-19为24%,上农矮生高羊茅18.81%。
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