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第一部分抗VEGF单克隆抗体-PEG-PLA-CDDP纳米胶束的制备及表征目的:本部分拟制备出抗VEGF单克隆抗体偶联两亲性聚合物纳米载药胶束,并装载难溶性抗癌药物顺铂（CDDP）。通过两亲性聚合物载体在水中自组装形式包裹药物,从而增加溶解度、延长半衰期,改善持续缓释性和主动靶向能力。方法:本实验采用新型载体材料氨基聚乙二醇-聚乳酸（NH2-PEG-PLA）与模型药物顺铂按一定比例,以透析法制备载药胶束。抗VEGF单克隆抗体的偶联:以碳化二亚胺为交联剂,将抗VEGF单克隆抗体与载药胶束进行偶联,制备双重靶向胶束Ab-PEG-PLA-CDDP。使用动态光散射仪表征Ab-PEG-PLA-CDDP纳米胶束,计算包封率和载药量。测定Ab-PEG-PLA-CDDP体外释放药物规律。结果:应用不同溶剂类型,药物与载体的投料比以及有机相与水相的体积比,成功制备出Ab-PEG-PLA-CDDP纳米胶束,并测定其粒度大小和包封效率。按最优制备方式为:丙酮作为溶媒,药物与载体的质量比为1:15,有机相和水相的体积比为2:10。按照最佳工艺得到的Ab-PEG-PLA-CDDP纳米胶束平均粒径在（102±2.08）nm,包封率为（64.36±1.18）%,载药率为（5.84±0.11）%。结论:本实验中,载体材料为NH2-PEG-PLA,模型药物为CDDP,制备出Ab-PEG-PLA-CDDP纳米胶束,应用单因素试验和正交设计试验优化制备工艺,选择最优处方。激光粒度分析仪测定聚合物胶束粒径分布范围符合要求。第二部分抗VEGF-PEG-PLA-CDDP纳米胶束中抗癌药物CDDP含量的测定目的:建立一种测定抗VEGF单克隆抗体-PEG-PLA-CDDP胶束包封率和载药率的方法。方法:紫外分光光度法测定抗VEGF单克隆抗体-PEG-PLA-CDDP纳米胶束中CDDP含量。通过配制CDDP标准溶液进行波谱扫描以确定合适吸收波长。取不同浓度溶液,采用UV法测定已知波长下的吸光度,以浓度（ug/ml）为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,计算标准曲线方程,测定精密度和回收率。结果:通过紫外扫描测得药物在348nm波长处有吸收,载体在该波长处无吸收并不干扰测量结果。药物在2.0-7.0ug/ml范围内呈线性关系,绘制出标准曲线并计算得到回归方程为:y=0.1069x+0.0046（R2=0.9985）,日内和日间精密度小于5%,平均回收率99.4%。结论:紫外光分光度计法（UV法）检测抗VEGF单克隆抗体-PEG-PLA-CDDP纳米胶束的包封率和载药量符合方法学要求,简单可行。第三部分抗VEGF单克隆抗体-PEG-PLA-CDDP对RSCC-1细胞体外抑制实验目的:研究Ab-PEG-PLA-CDDP纳米胶束对兔舌癌细胞（RSCC-1）的体外抑制作用。方法:将RSCC-1细胞经复苏、传代培养至对数生长期。经与PBS、NH2-PEG-PLA空白载体、不同浓度的CDDP和Ab-PEG-PLA-CDDP共同培养不同时间后,MTT检测其体外细胞毒性,统计细胞生长抑制率并绘制抑制率曲线。结果:MTT结果示NH2-PEG-PLA载体对RSCC-1细胞无细胞毒作用（p≤0.05）;市售CDDP剂型组呈明显细胞毒作用,生长抑制率曲线显示,随药物浓度和作用时间的增加而逐渐升高;Ab-PEG-PLA-CDDP纳米胶束剂型组48h时生长抑制率低于市售CDDP剂型组（p≤0.05）,至96h时与市售CDDP组己无统计学差异（p≤0.05）。结论:1)Ab-PEG-PLA-CDDP聚合物胶束对RSCC-1细胞具有显著抑制作用,且呈现时间和剂量依赖性。2)Ab-PEG-PLA-CDDP聚合物胶束较市售CDDP剂型具有缓释特性。第四部分抗VEGF单克隆抗体-PEG-PLA-CDDP纳米胶束体内分析方法的建立目的:建立一种检测抗癌药物顺铂在体内组织分布的分析方法方法:采用高效液相色谱（HPLC）技术,检测分析新西兰白兔肝组织及血浆中CDDP含量。研究分析组织内及血浆的专属性、重复性、稳定性、计算精密度及回收率,绘制相应标准曲线图。结果:成功检测正常兔组织及血浆中抗癌药物CDDP的含量。组织和血浆样品精密度RSD均小于5%,重复性、稳定性RSD均小于10%。组织中CDDP含量在0.1-10.0ug/ml范围内呈线性关系,结合数据绘制出标准曲线方程为:y=49013x+19141（R2=0.9995）。血浆中CDDP含量介于0.1-10.0ug/ml范围内,计算标准曲线方程:y=36268x+9666.7（R2=0.9905）,回收率均符合样品检测学标准。结论:采用高效液相色谱法检测正常兔组织及血浆中CDDP含量,其方法专属性好,稳定性、重复性、精密度和回收率均符合样本验证指导原则。为后续实验验证Ab-PEG-PLA-CDDP聚合物胶束靶向治疗兔舌癌移植瘤动物模型时组织及血浆内CDDP含量的测定提供检测基础。