目的观察耳甲电针对慢性不可预知温和应激(CUMS)诱导的抑郁大鼠行为学及前额叶皮质NF-κB/NLRP3/IL-1 β通路表达的影响,探讨耳甲电针抗抑郁效应的机制。方法1.实验分组:24只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、耳甲电针组、耳缘电针组,每组6只。各组大鼠均在实验前适应性饲养1周。2.造模方法:采用孤养结合连续35天CUMS方法制备抑郁大鼠模型。刺激方法包括潮湿垫料(24h)、昼夜颠倒(12/12h)、束缚(2h)、夹尾(3min)、冷水游泳(4℃,5min)、禁食(24h)、禁水(24h)。以上应激刺激每日一种,且连续两天的刺激不可重复,随机安排在35天内。非应激期间可自由摄食饮水。3.干预方法:(1)耳甲电针干预方法:2%异氟烷吸入麻醉大鼠,采用韩式穴位神经刺激仪HANS-200A,连接正负圆形自吸附导电磁铁,无创固定于大鼠双侧耳甲腔,即耳迷走神经分布区。疏密波,强度2mA,频率2/15Hz,每次刺激30min,持续21天。(2)耳缘电针干预方法:正负圆形自吸附导电磁铁,无创固定于大鼠双侧耳缘部,即没有耳迷走神经分布的部位。其余操作与耳甲电针相同。4.各组实验方法(1)空白组:群养6只/笼,不接受造模和干预。(2)模型组:动物孤养,每日接受CUMS造模,持续35天。(3)耳甲电针组:动物孤养,每日接受CUMS造模,持续35天。造模14天后,每日应激前2h加入耳甲电针刺激,每日一次,持续21天。(4)耳缘电针组:动物孤养,每日接受CUMS造模,持续35天。造模14天后,每日应激前2h加入耳缘电针刺激,每日一次,持续21天。5.指标检测及方法:在实验第0、14、35天采用体质量测量、旷场实验、糖水偏好实验评价大鼠行为学表现;实验结束后用Western blot法检测各组大鼠前额叶皮质NF-K B,NLRP3,IL-1 β的表达水平。结果1.各组大鼠行为学变化实验前,各组大鼠体重、糖水偏好指数、旷场实验水平穿越格数与垂直站立次数均无明显差异(P>0.05);实验第35天,与空白组比较,模型组大鼠体质量、糖水偏好指数、旷场实验水平穿越格数与站立次数显著降低(P<0.01),造模成功;与模型组比较,耳甲电针组大鼠体重、糖水偏好指数、旷场实验水平穿越格数与站立次数显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,耳缘电针组大鼠糖水偏好指数、水平穿越格数和站立次数显著升高(P<0.01),但低于耳甲电针组水平。2.各组大鼠前额叶皮质NF-κB、NLRP3、IL-1 β的水平变化(1)与空白组比,模型组NF-κB表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,耳甲电针组NF-κ B表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,耳缘电针组NF-κ B表达无统计学差异(P>0.05)。(2)与空白组比,模型组NLRP3表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,耳甲电针组NLRP3表达显著降低(P<0.01);与模型组相比,耳缘电针组NLRP3表达显著降低(P<0.05)。(3)与空白组比,模型组IL-1 β表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,耳甲电针组与耳缘电针组IL-1 β表达均显著降低(P<0.01)。结论1.耳甲电针和耳缘电针均可改善抑郁大鼠行为学表现,但耳甲电针的效应在各方面都强于耳缘电针。孤养结合CUMS导致模型大鼠前额叶皮质NF-κ B,NLRP3,IL-1β表达显著升高,耳甲电针可以扭转这些表现。2.耳甲电针改善大鼠抑郁样行为的机制,可能与降低NF-κB水平和NLRP3炎性小体激活,进而减少IL-1β分泌,从而缓解炎性反应引起的脑损伤有关。