慢性乙型肝炎抗病毒治疗CD8 T淋巴细胞CD127分子表达的动态研究

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研究背景:越来越多的研究证据表明,慢性病毒感染性疾病抗病毒免疫应答过程中CD127在CD8 T细胞上的表达提示效应CD8 T细胞中有效分化成为了记忆细胞的亚群。CD127在CD8 T细胞上的表达可作为一个预测慢性病毒感染性疾病进展状况的重要标记。研究目的:本研究的目的是检测慢性乙型肝炎(CHB)患者各种CD8 T细胞亚群上的CD127的表达水平,探究记忆性CD8 T细胞CD127的表达水平与血清病毒载量(HBV DNA)及乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)之间的关系。同时探究聚乙二醇干扰素α-2a和替比夫定抗病毒治疗对CHB患者记忆性CD8 T细胞CD127分子表达的影响。方法:1.20例HBeAg阳性慢性乙肝患者,接受聚乙二醇干扰素α-2a治疗,每周180μg,皮下注射,持续治疗至48周,并随访24周。20例HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者;HLA-A2阳性;服用替比夫定,每天600mg,口服,共48周。2.新鲜采集外周静脉血EDTA-K2抗凝;2-4h内进行外周血分离PBMC,四色直接免疫荧光标记法检测CD8、CD45RA、CD27、CD 127在淋巴细胞上的表达。外周血CD8+T细胞根据CD45RA、CD27的表达情况分类。3.检测HBV特异性CD8 T细胞频率:全血或PBMC,CD3设门,检测CD8中HBVcorel8-27/envl83-191特异性T淋巴细胞频率以及HBV特异性CD8 T细胞CD127表达频率。结果:1.慢性乙肝患者在CD45RA-CD27+中心记忆性CD8 T细胞上CD127的表达较正常对照相比明显降低(P<0.05),其表达水平与慢性血清HBV DNA水平和HBeAg呈负相关。2.聚乙二醇干扰素a-2a抗病毒治疗后疗效较佳者随着HBV DNA和HBeAg水平下降,记忆性CD8 T细胞表面的CD127分子表达明显增加,而疗效不佳者则无明显变化(P<0.05)。3.20例替比夫定治疗CHB,48周时检测结果:6例应答充分:HBV DNA阴转和HBeAg血清转换;中心记忆性CD8 T细胞的CD127表达逐渐增加,至治疗48周达到较高水平,与无应答者相比差异显著。10例部分应答:HBV DNA在103拷贝/ml和104拷贝/ml之间,或较治疗前下降≥log2,HBeAg阳性或阴性。中心记忆性CD8+T细胞的CD127表达介于应答充分者和无应答者之间。4例无应答:HBV-DNA>105拷贝/ml,HBeAg仍阳性。中心记忆性CD8 T细胞的CD127没有明显增加。抗病毒治疗应答充分的CHB,病毒特异性CD8 T细胞重新获得CD127的表达,较治疗前和无应答者有显著差异。结论:1.慢性乙型肝炎患者外周血中心记忆型CD8 T细胞CD127表达显著下降,是慢性乙型肝炎患者细胞免疫缺陷的潜在机制之一2.CHB中心记忆性CD8 T细胞CD127分子的表达与血清HBV DNA水平和HBeAg呈负相关。3.有效的聚乙二醇干扰素抗病毒治疗能使CHB患者有较多的CD8 T细胞向记忆性细胞转化,增加记忆性CD8 T细胞CD127分子的表达。4.替比夫定具有同样的作用,并能增加HBV特异性CD8 T细胞CD127分子的表达。5.检测CHB病人记忆型CD8 T细胞或HBV特异性CD8 T细胞CD127分子的表达可以作为判断抗病毒治疗疗效的重要指标,可以帮助临床医师更好的制定抗病毒治疗疗程。
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