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目的:目前临床上对流产的病因诊断中，免疫性因素受到越来越多的关注。现代生殖免疫学认为，成功的妊娠是一种外周免疫耐受，母体对胎儿的免疫耐受使得妊娠得以维持，直至分娩。如果这种耐受平衡被打破，就可能导致流产或不孕。自身抗体阳性已成为流产的常见病因，因此，检测自身抗体也成为常用的一种诊断手段。检测的自身抗体主要包括抗精子抗体(anti-sperm antibody，AsAb)、抗子宫内膜抗体抗(anti-endometriaantibody，EMAb)和抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody，AcA)。对自身抗体阳性者多采用小剂量免疫抑制剂---糖皮质激素（强的松）和阿司匹林进行联合治疗。 CD4+CD25+调节性T细胞（Regulatory T cells，Tregs）是近年来确定的一类具有免疫抑制功能的辅助性T细胞亚群，具有维持自身免疫平衡、负调控免疫应答的功能。细胞内叉头状转录因子-3(forkhead/winged-helixtranscription factor，Foxp3)是参与Tregs分化、发育的关键调节分子，可以抑制IL-2基因转录、活化。CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞可以通过非抗原特异性方式，抑制CD4+与CD8+T细胞增殖和分泌细胞因子，抑制树突状细胞和单核细胞功能，从而发挥免疫抑制作用，也可以通过分泌细胞因子，如转化生长因子β(Transforming growth factor-be-ta，TGF-β，)等发挥免疫抑制功能。目前CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞在自身免疫性疾病中的作用日益受到重视，有关CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞在妊娠中发挥重要作用的报道也越来越多。本研究通过流式细胞仪检测自身抗体阳性的流产妇女外周血中CD4+CD25+ Foxp3+T细胞的数量，观察糖皮质激素治疗前后，CD4+ CD25+Foxp3+T细胞的数量变化，探讨CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞与流产的相关性，为流产和不孕不育的治疗提供新的思路，为开发有针对性治疗流产或不孕不育的新方法提供实验依据。 方法: 1、研究对象： 1.1流产组 30例于2012年9月至2014年2月期间在河北医科大学第四临床医院生殖医学科就诊的女性患者。所有研究对象均至少有过一次早期流产或胎停育经历，排除了染色体、激素、器官性疾病、感染等因素，B超监测排卵功能正常，男方各项检查均正常，经ELISA方法定性检测AsAb(IgM)、EMAb(IgM)和AcA(IgM)三项抗体中至少有一项为阳性，符合以上条件者即选入流产组。 1.2治疗组 30例流产妇女（年龄与流产组相近，入选条件同流产组），经强的松治疗后，AsAb(IgM)、EMAb(IgM，IgG)和AcA(IgM，IgG)均为阴性者。 1.3正常对照组 30例年龄与流产组及治疗组相匹配的经产健康妇女。 2、方法： 2.1采集所有研究对象的抗凝静脉血及血清。 2.2首先采用ELISA方法定性测定所有研究对象血清中AsAb(IgM)、EMAb(IgM，IgG)和AcA(IgM，IgG)。试剂由深圳安群公司提供，检测过程均按说明书严格操作，酶标仪于450 nm处测定各孔OD值，样品孔OD值/临界值≥1判断为阳性。然后采用ELISA方法定量检测三组的AsAb(IgM)、EMAb(IgM)和AcA(IgM)水平，试剂由美国TSZ公司提供。 2.3采用密度梯度离心法分离各组外周血单个核细胞(peripheril bloodmononuclear cell，PBMC)，经流式细胞仪检测三组PBMC中CD4+T细胞、CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞、CD4+ Foxp3+T细胞、CD4+ CD25+T细胞的数量。 结果: 1、各组妇女血清中AsAb(IgM)、EMAb(IgM)和AcA(IgM)的水平 流产组妇女血清中AsAb(IgM)水平(29.45±6.98 pg/ml)、EMAb(IgM)水平(304.10±17.69 pg/ml)和AcA(IgM)水平(182.90±10.94 U/ml)均明显高于正常对照组(5.73±1.30 pg/ml)、(50.20±5.71 pg/ml)和(36.18±3.85 U/ml)（均P＜0.01）。治疗组妇女血清中AsAb(IgM)水平(6.69±1.69 pg/ml)、EMAb(IgM)水平(79.22±6.71 pg/ml)和AcA(IgM)水平(52.23±5.01 U/ml)均明显低于流产组（均P＜0.01）。 2、各组妇女PBMC中CD4+T细胞、CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞、CD4+Foxp3+T细胞和CD4+ CD25+T细胞的数量。 2.1各组妇女PBMC中CD4+T细胞的比例 流产组妇女PBMC中CD4+T细胞的比例(28.42±10.01％)与正常对照组(33.69±14.42％)及治疗组（31.04±11.02％）比较均无统计学差异;治疗组与正常对照组亦无统计学差异。 2.2各组妇女PBMC中CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞在CD4+T细胞中的比例 流产组妇女PBMC中CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞在CD4+T细胞中的比例（1.12±1.22％）明显低于正常对照组（5.22±3.09％）(P＜0.01)，治疗组（1.40±0.82％）与流产组比较无统计学差异（P＞0.05），治疗组明显低于正常对照组(P＜0.01)。 2.3各组妇女PBMC中CD4+ Foxp3+T细胞在CD4+T细胞中的比例 流产组妇女PBMC中CD4+Foxp3+T细胞在CD4+T细胞中的比例（1.34±1.88％）明显低于正常对照组（6.67±5.35％）(P＜0.01);治疗组CD4+ Foxp3+T细胞比例（3.15±3.21％）明显高于流产组(P＜0.01)，但仍明显低于正常对照组(P＜0.01)。 2.4各组妇女PBMC中CD4+ CD25+T细胞在CD4+T细胞中的比例 流产组妇女PBMC中CD4+ CD25+T细胞在CD4+T细胞中的比例(5.39±3.78％)明显低于正常对照组（7.44±2.48％）(P＜0.01)，但与治疗组(7.01±4.31％)比较无统计学差异（P＞0.05）。 3、流产组妇女外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞数量与自身抗体的相关性分析 流产组妇女PBMC中CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞数量与抗精子抗体AsAb(IgM)和抗心磷脂抗体AcA(IgM)水平均无明显相关性;抗子宫内膜抗体EMAb(IgM)与CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞数量之间存在负相关趋势，但未达到统计学差异水平。 结论: 1、流产组妇女血清中抗精子抗体AsAb(IgM)水平、抗子宫内膜抗体EMAb(IgM)水平和抗心磷脂抗体AcA(IgM)水平均明显升高，经强的松治疗后这三种自身抗体的水平明显降低。 2、流产组妇女外周血PBMC中CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞数量明显降低，强的松治疗对CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞数量无明显影响。 3、流产组妇女外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞数量与抗精子抗体AsAb(IgM)水平和抗心磷脂抗体AcA(IgM)水平均无明显相关性;抗子宫内膜抗体EMAb(IgM)水平与CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞数量之间有负相关趋势。