鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma，NPC)是原发于鼻咽粘膜上皮的恶性肿瘤，是我国发病率最高的十大恶性肿瘤之一，也是最常见的头颈部肿瘤。NPC发病隐匿，发现时常常已有颈部淋巴结和远处转移，因此，早期发现和早期诊断对其治疗及预后具有重要的意义，但目前尚无一种快速有效的NPC早期诊断手段，鼻咽癌血清蛋白质组学研究对NPC发病机制和早期诊断具有重要意义。NPC血清蛋白质组学研究可以发现NPC相关血清蛋白质，研究成果可应用于NPC的临床诊断、病程监测、疗效监控和判断预后等多个方面，具有重要的实用价值和广阔的应用前景。本研究是在建立血清双向凝胶电泳技术以及优化各种试验条件的基础上，采用双向凝胶电泳(two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis，2-DE)联合质谱技术(mass spectrometry，MS)进行NPC血清比较蛋白质组学研究，通过比较NPC淋巴结转移组(37例)、NPC未有淋巴结及远处转移组(27例)和正常对照组(42例)血清2-DE图谱，找出差异蛋白质点，鉴定NPC相关蛋白质以及与NPC转移相关的蛋白质。并对鉴定出的NPC相关蛋白质进行血清学验证和免疫组化验证。具体结果如下：1．在建立血清双向凝胶电泳技术的实验中，通过对血清双向凝胶电泳中血清标本的收集、保存，血清高丰度蛋白的去除，电泳条件，上样量，IPG干胶条的选择及缓冲液的配制等多种条件和技术方法进行调整，建立了较稳定和较好重复性的血清双向凝胶电泳技术，2-D图谱的分辨率得到一定的提高，有效分离的蛋白质点明显增多，许多低丰度蛋白被分离出来。2．在NPC血清比较蛋白质组学研究中，图谱比较获得29个差异蛋白质点，经质谱成功鉴定了23种蛋白质。与正常组比较，转铁蛋白、锌指蛋白544、甲状腺激素结合蛋白、NM23-H1蛋白和FAD合成酶在两组鼻咽癌患者中低表达；12-脂氧合酶、血清淀粉样蛋白Al前体、细胞色素P450、sICAM-1、组织蛋白酶G和组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1等在两组鼻咽癌中均高表达，其中12-脂氧合酶、sICAM-1、组织蛋白酶G和组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1在鼻咽癌转移组中比未转移组中表达增高，而热休克蛋白70则只在鼻咽癌转移组表达。3．在验证所鉴定的NPC相关蛋白质实验中，通过ELISA实验发现sICAM-1、SAA和HSP70这3种蛋白质在鼻咽癌组与正常对照组、淋巴结转移组与无淋巴结转移组之间均存在显著差异。而且这3种蛋白质均与鼻咽癌的分期密切相关，随着临床分期的提高，其血清水平和阳性率均逐渐增高。双变量相关分析发现这3种蛋白质在鼻咽癌患者血清中均具有相关性。免疫组化验证实验显示57例鼻咽癌组织中ICAM-1和HSP70的阳性表达率分别为75.4％和63.2％，且ICAM-1和HSP70与NPC临床分期有相关性，同时发现ICAM-1和HSP70在鼻咽癌淋巴结转移组中的表达率均要明显高于鼻咽癌未转移组，说明ICAM-1和HSP70与鼻咽癌的转移具有一定相关性。ICAM-1和HSP70可作为判断鼻咽癌临床分期和预测预后的参考指标。本研究建立了较好的血清双向凝胶电泳技术，为进一步的分析、鉴定和寻找与疾病相关的蛋白质奠定一定基础；鉴定出23个与NPC相关的血清蛋白质并验证了其中3种相关蛋白质。研究结果提示，它们可能与NPC的发生发展相关，并可望成为鼻咽癌早期诊断和治疗的潜在标志物。