【摘 要】
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人类基因组框架图的完成后,各国科学家的研究重点逐渐转移到蛋白质上来,所以蛋白质科学成为了当今生命科学与生物技术领域最活跃的学科前沿。蛋白质结构数据是蛋白质研究的一
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人类基因组框架图的完成后,各国科学家的研究重点逐渐转移到蛋白质上来,所以蛋白质科学成为了当今生命科学与生物技术领域最活跃的学科前沿。蛋白质结构数据是蛋白质研究的一项关键性基础数据,尤其是蛋白质功能的研究更离不开清晰的内部结构。本文着眼于蛋白质的表达、纯化和结晶工作,选取福氏志贺菌抗氧化蛋白Sf2523与胡杨抗非生物胁迫信号转导途径蛋白PeCBL1为研究对象,通过分子生物学手段成功构建原核表达系统,并可溶地表达了目的蛋白,运用亲和层析、分子排阻色谱、离子交换层析等方法得到了纯度较高的蛋白,并进行了初步的结晶筛选。Sf2523蛋白得到了晶型较好的三维单晶,而PeCBL1蛋白目前仅得到针状微晶,仍需要进一步的优化。在Sf2523蛋白的结晶优化过程中,常规优化方法无法得到理想结果的情况下,考虑到目的蛋白较小,切除了不受重视的His-tag标签后,Sf2523结晶行为有了很大改观,出现了晶型较好的三维单晶。
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