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目的面神经为周围神经系统重要的一支,是颅神经中走行最长的。因为其结构和位置的特殊性,极易受到损伤。损伤后的局部面神经根会发生脱髓鞘的改变。本实验观察大鼠面神经损伤后髓鞘修复效果及电生理变化的影响,测定局部髓鞘蛋白及细胞因子的表达分布,探讨可能的分子机制,为人脐带沃顿胶薄片修复面神经损伤奠定实验基础。方法将64只成年SD大鼠,体重180g-210g。采用随机数字表法将大鼠随机分成假手术组(n=14)、单纯损伤组(n=25)及人脐带沃顿胶薄片组(n=25),假手术组只暴露大鼠右耳茎乳突处面神经主干,面神经损伤模型组采用小号血管钳钳夹面神经主干10s,造成神经挤压伤模型。人脐带沃顿胶组织块置于培养基中激活后,采用细胞切片机,将人脐带沃顿胶组织块修剪成5mm×5mm薄片,贴附于面神经挤压伤处。分别于术后第1d、3d、10d、20d、30d观察面神经功能的恢复情况,观察大鼠眨眼反射、触须运动、及鼻尖位置居中等行为学的变化。术后第30d测定面神经电生理变化,记录大鼠口轮匝肌动作电位的波幅、潜伏期变化。取损伤处面神经主干,采用HE染色观察面神经的病理改变,免疫组化观察BDNF(脑源性神经营养因子)的表达情况。电镜观察面神经的超微结构。Western blot检测神经生长因子MBP,BDNF及NGF在损伤处的表达情况。ELISA测定面神经损伤区域炎症因子IL-1β、IL-10、TNF-α,NF-κB的分泌数量。结果术后第一天单纯损伤组及人沃顿胶薄片组大鼠的行为学表现为眼睑闭合不全,鼻尖偏向左侧,右侧触须运动消失。随着时间的延长,单纯损伤组大鼠面神经损伤变化并无明显改善,在1d、7d、10d、20d、30d各时间点面神经功能评分差异无统计学意义(F=4.57,P>0.05),人脐带沃顿胶薄片组的面神经功能行为学改善明显好转(F=10.35,P<0.05),30d时评分为(1.63±0.40),单纯损伤组(4.22±1.05),二者差异有统计学意义(t=7.90,P<0.05)。电生理测定结果显示人脐带沃顿胶薄片组大鼠面神经复合肌肉动作电位的潜伏期及波幅分别为(1.04±0.75ms、1.73±0.44mv),单纯损伤组潜伏期及波幅分别为(6.10±1.80ms、0.67±0.19mv),二者差别有统计学意义(t=13.66,P<0.05)。术后30d,HE染色提示单纯损伤组的表现为染色区域的中断及缺失,提示广泛的脱髓鞘改变、人脐带沃顿薄组在术后30d染色缺损区域明显减少,面神经组织结构恢复、髓鞘完整性明显好转。免疫组化提示:与假手术组相比,单纯损伤组和沃顿胶薄片组BDNF蛋白免疫反应均存在阳性细胞。且沃顿胶薄片组阳性细胞数量更加明显。电镜观察显示沃顿胶薄片组治疗后髓鞘明显增厚,细胞器数量增多,空泡状改变明显变少。Western blot结果证实MBP,BDNF及NGF的表达在人脐带沃顿胶薄片组明显增多,与单纯损伤组相比差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果显示在人脐带沃顿胶薄片组IL-1β、IL-10、TNF-α,NF-κB表达明显降低。结论人脐带沃顿胶薄片能够促进大鼠面神经损伤后的髓鞘修复,改善大鼠面神经损伤后行为学及电生理情况,其机制可能与人脐带沃顿胶薄片上MBP表达,促进神经营养因子BDNF、NGF等的分泌,减少IL-1β、IL-10、TNF-α,NF-κB等相关炎症因子的分泌,改善损伤区域的局部微环境。