脑胶质瘤起源于神经胶质细胞。是最常见的大脑恶性肿瘤。根据WHO的分类标准,脑胶质瘤分为Ⅰ-Ⅳ级,低级别脑胶质瘤是Ⅰ、Ⅱ级,高级别脑胶质瘤是Ⅲ、Ⅳ级。从病理分型来看,常见的高级别胶质瘤包括间变性星形细胞瘤、间变性少突细胞瘤、间变性少突星形细胞瘤和胶质母细胞瘤。近些年来,脑胶质瘤呈逐年递增的趋势。尤其以老年人多见,男性发病率高于女性。脑胶质瘤通常为慢性起病,一般表现为颅内压增高的症状如头晕头痛、恶心呕吐、视力改变以及精神症状,同时颅内肿瘤的压迫以及侵犯可出现部分神经功能的缺失和癫痫发作等。目前脑胶质瘤的医治以手术为主,同时联合放疗、化疗等西医治疗模式。综合的西医治疗后患者面临两个主要问题,一是高级别胶质瘤极易复发,目前尚无有效的预防复发的手段,同时复发后缺乏有效的治疗方法,复发后严重影响患者生存期。二是治疗后患者将遗留神经损伤,严重影响患者生活质量。因此研究中医中药在预防复发及改善症状方面具有重大的现实意义。对于脑胶质瘤的认识,中医认为在正气亏虚下,风、痰、瘀、毒多种病理因素共同治病。化痰散瘀消瘤方采用祛风化痰、散瘀解毒消瘤之法以熄风涤痰,攻毒散结,在中医理论指导下本研究以化痰散瘀消瘤方为治疗药物设计临床和实验两部分以验证疗效并探讨可能的机制。1目的通过临床观察化痰散瘀消瘤方联合化疗治疗对比单纯化疗治疗高级别胶质瘤术后放疗后的患者,客观评价两组患者的DFS、OS以及生存质量、卡氏评分、中医证候、卒中量表的改善情况以评估临床疗效,同时通过动物实验探讨化痰散瘀消瘤方对人神经胶质细胞瘤细胞U87的具体抑瘤效果并进一步检测瘤组织血管内皮生长因子及相关自噬因子的表达,分析化痰散瘀消瘤方抑制U87细胞的可能途径。2方法2.1临床研究方法:依据一定的诊断、纳入、排除标准筛选2019年01月至2019年12月在广安门医院及天坛医院、右安门医院就诊的高级别胶质瘤术后放疗后患者,随访至2021年12月,排除脱落和失访病例,最终在广安门医院纳入的患者32例为试验组,天坛医院、右安门医院纳入的31例为对照组。试验组在西医标准治疗基础上加用化痰散瘀消瘤方治疗24周。对照组采用西医标准的化疗治疗24周。评价患者的无病生存期、总生存期并依据QLQ-BN20量表、KPS评分、NIHSS量表、中医证候评分来评估患者生活质量、中医证候及神经功能的改善情况并检查血常规、肝肾功以评估不良反应。2.2实验研究方法:完成人神经胶质细胞瘤细胞U87接种的裸鼠荷瘤动物模型共40只,随机将这40只裸鼠分为模型组、对照组、中药低、中、高剂量组及中药低、中、高剂量联合化疗组共8组,每组5只。其中模型组给与去离子水,对照组给与替莫唑胺溶液,3组中药组给与不同剂量的化痰散瘀消瘤方溶液,3组中药联合化疗组则采用不同剂量的化痰散瘀消瘤方溶液联合替莫唑胺溶液以灌胃,给药21天后处死小鼠,取各组小鼠的瘤块称重;HE染色观察内脏器官心、肝、脾、肺、肾细胞形态结构变化;Western blot检测VEGF、LC3、P62相关蛋白表达。3结果3.1临床观察结果3.1.1基线情况:两组年龄基线、性别基线、肿瘤部位基线、病理类型基线、放疗技术、放疗剂量基线、手术据放疗开始时间基线和治疗前生命质量QLQ-BN20评分、卡氏评分、中医证候评分、国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分等基线比较。统计显示各组基线一致,差异无统计学意义（P＞0.05）。3.1.2疗效评价:无病生存期（DFS）情况,试验组化痰散瘀消瘤方联合化疗较对照组能使中位无病生存期延长（13.56VS10.00个月,P=0.007＜0.05）,具有统计学差异,说明化痰散瘀消瘤方联合化疗后可以使高级别胶质瘤术后放疗后患者的无病生存期得到有效延长。卡氏评分情况,两组患者在治疗后均得到改善,试验组评分88.44±11.11,对照组评分79.68±1.64,P＜0.001,具有统计学差异,证明化痰散瘀消瘤方可以提高患者生活质量。中医证候评分情况,治疗后两组评分均得到改善,试验组评分为10.31±0.34,对照组为12.65±0.49,P＜0.001,具有统计学差异,结果显示,化痰散瘀消瘤方可以改善中医证候,减轻患者症状。总生存期（0S）情况,统计两组患者的总生存期情况,中位0S试验组较对照组（20.59VS18.23个月,P=0.130＞0.05）,无统计学差异。生命质量测定量表QLQ-BN20情况,两组患者在治疗后均得到改善,试验组评分28.75±1.34,对照组评分30.94±1.53,P=0.287＞0.05,不具有统计学差异。NIHSS评分情况,治疗后两组评分均得到改善,试验组评分为2.38±0.19,对照组为2.77±0.18,P=0.136＞0.05,无统计学差异。化痰散瘀消瘤方在治疗过程中未出现严重不良反应,安全有效。3.2实验研究结果3.2.1造模成功后,连续给药21天处死裸鼠,取各组瘤块,进行称重,统计各组瘤重的差异。测量瘤重数据,可以得到对比模型组,对照组,中药高剂量组,中药低、中、高剂量联合化疗组瘤重明显减少（P＜0.05,P＜0.001）,因此可以看出化痰散瘀消瘤方可以控制裸鼠人神经胶质瘤细胞U87的生长。HE染色观察心肝脾肺肾组织细胞形态结构情况,较模型组,无明显损伤,说明中药及中药联合替莫唑胺治疗安全。3.2.2取各组肿瘤组织进行WB检测,与模型组对比,对照组,中药中、高剂量组,化疗联合中药中、高剂量组,VEGF表达显著降低（P＜0.001）,提示中药及中药联合化疗可以抑制VEGF的表达,其为化痰散瘀消瘤方治疗高级别胶质瘤的作用机制之一。3.2.3各组裸鼠给药21天后,取肿瘤组织对自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,P62蛋白相对表达量进行WB检测,与模型组相比,对照组、中药中剂量组及化疗联合中药低、中、高剂量组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著升高（P＜0.001）,中药低、高剂量组则LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著降低（P＜0.001）;与模型组相比,对照组、中药中剂量组及化疗联合中药低、中、高剂量组P62显著升高（P＜0.001）,中药低、高剂量组P62显著降低（P＜0.001）,p62水平的升高常常伴随着自噬激活的现象,机制上认为p62是一种应激蛋白,在某些条件下,例如化疗或者中药治疗时可以刺激p62的表达水平上调,调控这一过程的是转录因子EB。基于P62的调节作用,该实验可以看到,相较于模型组,对照组、中药中剂量组及中药低、中、高剂量联合化疗组P62显著升高,它发挥抗肿瘤的作用其一可能是减少肿瘤的营养供给同时调节肿瘤的微环境以使肿瘤细胞无法适应缺乏营养的状态而抑制肿瘤增长,其二则是药物的治疗导致自噬的激活,从而抑制肿瘤。该实验中与模型组相比,对照组、中药中剂量组及化疗联合中药低、中、高剂量组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著升高,说明其机制可能是增加了自噬水平而达到抑制肿瘤的作用。4结论4.1临床观察:针对高级别脑胶质瘤术后放疗后患者,观察化痰散瘀消瘤方联合化疗与单纯化疗对比,对患者无病生存、总生存、生活质量、中医证候、神经功能缺损程度进行观察。结果化痰散瘀消瘤方联合化疗可以延长患者无病生存,提高患者生活质量,减轻相关症状,安全有效。4.2实验研究:化痰散瘀消瘤方可以控制裸鼠人神经胶质瘤细胞U87的生长,其可能的机制是抑制VEGF的表达从而达到抗血管生成的作用,并且化痰散瘀消瘤方可以通过对P62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的调控以实现对自噬的激活从而抑制肿瘤生长。