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目的:探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis)患者外周血CD34+造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,HSC/HPC)数目变化。同时,检测RA患者外周血CD34+ HSC/HPC Wnt5a、Beta-catenin信号分子的基因表达水平,了解Wnt信号途径分子基因表达的异常与临床指标的关联性;检测RA患者外周血CD34+HSC/HPC的核因子(nuclear factor kB,NFkB)kB1、kB2,P15 INK4b信号分子的基因表达水平,了解NFkB信号途径分子基因表达的异常与临床指标的关联性。方法:采用FITC荧光抗体标记,以流式细胞术检测34例RA患者和16例正常人外周血CD34+ HSC/HPC,分析CD34+HSC/HPC占全部淋巴细胞的百分率。收集24例RA患者,9例正常对照组,分别抽取50ml抗凝外周血,淋巴细胞分离液分离单个核细胞,免疫磁珠分选CD34+ HSC/HPC,Trizol法提取总RNA,逆转录为cDNA,实时荧光定量聚合酶反应(real-time PCR)方法检测患者组和对照组Wnt5a、β-catenin、NFkB1、NFkB2、P15INK4bmRNA表达水平的差异,并与DAS28评分、血沉、C反应蛋白等相关性分析。结果:1)RA患者外周血CD34+HSC/HPC在淋巴细胞中所占的百分率[(0.13±0.09)%]比健康对照组显著降低[(0.38±0.21)%,P=0.00],差异有统计学意义。2)正常对照组Wnt5a、β-catenin mRNA的表达分别是[144.86(0.14—252.06)]、(8.87±4.81),与正常对照组相比,RA患者组Wnt5a mRNA表达低于正常对照组[1.15(0.09—71.52),P=0.004];β-catenin mRNA表达低于正常对照组[(4.96±4.52),P=0.037]。3)正常对照组NFkB1的表达是[2.14(0.68—7.09)],与正常对照组相比,RA患者组NFkB1 mRNA表达[6.57(1.08—76.71), P=0.013]高于正常对照组;NFkB2、P15INK4b mRNA表达与正常对照组无统计学差异。4) RA患者外周血CD34+ HSC/HPC Wnt5a、β-catenin、NFkB1、NFkB2、P15INK4b mRNA表达与有无MTX的治疗无统计学差异,与DAS28评分、血沉、C反应蛋白等临床指标无相关性。结论:1)RA患者外周血CD34+HSC/HPC的数目减少,RA患者造血干/祖细胞增殖能力受损。2)RA患者中,Wnt5a、β-catenin的表达下降,从而导致RA HSC/HPC增殖受损。Wnt信号调控造血干细胞的异常可能导致RA患者造血干/祖细胞增殖能力受损的信号通路之一。3)RA患者外周血CD34+ HSC/HPC NFkB1基因表达水平比正常对照增高,可能是RA患者CD34+细胞重要缺陷。