p73α与14-3-3σ在不同乳腺癌细胞系中的表达及其相互作用的研究

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目的:肿瘤抑制基因p53在1979年被首次报道,是迄今为止发现的与人类肿瘤相关性最高的基因。野生型p53蛋白在调节细胞生长,抑制恶性肿瘤发展中起着重要的作用。近年有学者发现了两个基因p63和p73,它们与p53基因在结构上高度同源,功能上也存在着非常复杂的关系,这一类基因称为p53基因家族,但其功能尚不完全明了。14-3-3σ是14-3-3基因家族中唯一一个能够被DNA损伤所诱导的成员。作为细胞周期负调控因子,14-3-3σ的活化可以使细胞周期停滞于G2期,抑制细胞的生长。本研究采用多种不同的实验方法,研究了不同p53状态的乳腺癌细胞系中p73α与14-3-3σ的基因表达情况,及p73α与14-3-3σ在基因水平上的相互调节作用。目的在于探索p73α与14-3-3σ在细胞增殖及癌变中的作用,及p73α与14-3-3σ之间的相互关系。方法:本研究选用p53野生型人类乳腺癌细胞系MCF-7,p53突变型人类乳腺癌细胞系MDA-MB-453,MDA-MB-231,MDA-MB-436,p53缺失型人类乳腺癌细胞系MDA-MB-157,以及模式细胞SV40转化的非洲绿猴肾细胞系COS-7, p53缺失型人类肺癌细胞系H1299,通过MTT分析,RT-PCR ,Western blot和免疫沉淀的方法研究在MDA-MB-436细胞系中,突变的p53对阿霉素(adrimycin,ADR)诱导DNA损伤产生的应答反应;通过基因转染,研究MDA-MB-436细胞系中,p73α对p53有
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