论文部分内容阅读
目的：肺癌是最常见的恶性肿瘤，也是亚洲和西方人群中癌症死亡的主要原因。近几十年来，在世界范围内，尤其是发达国家，肺癌的发病率和死亡率都在迅速上升。有报道显示，在我国肺癌居全国恶性肿瘤发病率和死亡率的第一位，并且其发病呈现年轻化趋势。2012年北京市卫生局统计数据显示，2010年肺癌居北京市户籍人口男性恶性肿瘤发病的第一位，在女性中也高居第二位，仅次于乳腺癌。2001年至2010年十年间，北京市肺癌发病率增长了56%。全市新发癌症患者中有五分之一为肺癌患者。肺癌可分为两大类：非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer，NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)，非小细胞肺癌（NSCLC）占全部肺癌的80％以上。NSCLC常转移到区域淋巴结、肝、对侧肺、脑和骨髓。大多数NSCLC患者死于转移。抑制NSCLC转移被认为是一个重要的治疗策略，因而参与肺癌转移的分子可能成为治疗非小细胞肺癌新的靶点。趋化因子又叫趋化细胞因子，是一类对多种白细胞亚群和一些非造血细胞具有强力激活和趋化作用的小分子多肽。基质细胞衍生因子1(stromal cell-drived factor-1,SDF-1)是骨髓基质细胞产生的CXC类趋化蛋白，其广泛地、组成性地表达于多种细胞和组织中。趋化因子受体4（CXCR4）属于具有7次跨膜结构域（7TM）的G蛋白偶联受体超家族成员（GPCRs）。CXCR4与其唯一的配体SDF-1结合构成SDF-1/CXCR4生物学轴，在胚胎发育、造血干细胞的动员与归巢、介导免疫及炎性反应、血管新生、HIV感染等领域具有重要的作用。越来越多的证据表明，SDF-1/CXCR4生物学轴在非小细胞肺癌的侵袭和转移过程中发挥重要的作用。基质金属蛋白酶（MMPs）是一组具有蛋白水解功能的含锌蛋白水解酶大家族，在组织正常的重塑和修复过程中负责降解胞外基质（ECM）成分，包括基底膜胶原蛋白等，基质金属蛋白酶的过度或不恰当的表达是导致与癌组织侵袭和转移的重要机制。基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)是MMPs家族中分子量最大的酶，是降解胞外基质（ECM）主要酶类之一，能够降解破坏ECM中最主要的组份Ⅳ、V型胶原蛋白和明胶，尤其是Ⅳ型胶原蛋白，与肿瘤的侵袭、转移的关系更为密切。已研究证实，MMP-9在头颈部癌、食管癌、胃癌、肝癌、非小细胞肺癌、乳腺癌等组织中高表达，与肿瘤的侵袭、转移密切相关。本实验采用免疫组织化学法分析CXCR4和MMP-9在NSCLC和正常肺组织（距癌组织边缘5cm以上）中的表达情况及与临床各指标间的关系，为NSCLC的侵袭和转移机制提供新证据，为NSCLC诊治及判断预后提供新的方法。方法：选取2010年9月-2013年1月于河北医科大学第四医院胸外科就诊的非小细胞肺癌患者组织标本71例，入选标准为：均经手术切除；术前均未行放化疗；术后均经病理证实。另取20例癌旁正常肺组织标本（距癌组织边缘5cm以上）作为对照组。分别记录患者性别、年龄、病理类型、分化程度、淋巴结转移情况、TNM分期等临床资料。采用免疫组织化学S-P三步法，分别检测实验组和对照组标本中CXCR4与MMP-9的表达水平。应用SPSS13.0统计学软件进行数据分析，采用卡方检验统计分析CXCR4及MMP-9与NSCLC各临床特征之间的关系。CXCR4与MMP-9之间的相关性采用Spearman等级相关分析。以P<0.05为差异有统计学意义。结果：1CXCR4免疫组织化学结果：免疫组织化学S-P法检验71例NSCLC组织和20例正常肺组织中CXCR4的表达水平。NSCLC组阳性率为60.6%（43/71），正常肺组织组为10%（2/20），经统计学学分析，NSCLC组CXCR4阳性表达率明显高于正常肺组织组（χ2=15.96，P=0.00＜0.05）。NSCLC组织中CXCR4的表达与患者年龄、性别无相关性(P＞0.05)而与分化程度、TNM分期、病理类型和淋巴结转移有相关性(P＜0.05)。2MMP-9免疫组织化学结果：免疫组织化学S-P法检验71例NSCLC组织和20例正常肺组织中MMP-9的表达水平。NSCLC组阳性率为67.6%（48/71），正常肺组织组为15%（3/20），经统计学分析，NSCLC组MMP-9阳性表达率明显高于正常肺组织组（χ2=17.52，P=0.00＜0.05）。NSCLC组织中MMP-9的表达与患者年龄、性别无相关性(P＞0.05)而与分化程度、TNM分期、病理类型和淋巴结转移有相关性(P＜0.05)。3NSCLC中CXCR4与MMP-9之间的相互关系：Spearman等级相关分析显示：CXCR4与MMP-9在NSCLC中成正相关性，r=0.550，P＜0.05结论：1CXCR4在NSCLC中的阳性表达较癌旁正常肺组织显著增高，且与患者年龄、性别无关而与分化程度、TNM分期、病理类型和淋巴结转移相关。CXCR4的表达随TNM分期递增；有淋巴结转移组中表达明显高于无淋巴结转移组。提示CXCR4的异常表达与NSCLC的淋巴结转移有关，在肺癌转移的过程中发挥重要作用。2MMP-9在NSCLC中的阳性表达较癌旁正常肺组织显著增高，且与患者年龄、性别等无关而与分化程度、TNM分期、病理类型和淋巴结转移相关。MMP-9的表达随TNM分期递增；在有淋巴结转移组中的表达明显高于无淋巴结转移组。提示MMP-9的上调表达能促进NSCLC的淋巴结转移，在肺癌转移的过程中起着重要作用。3CXCR4与MMP-9在NSCLC中的表达呈正相关，二者上调表达均与NSCLC的TNM分期和淋巴结转移有关。推测CXCR4和MMP-9在NSCLC的发展和淋巴结转移过程中具有协同作用。