小青龙汤对寒性哮喘小鼠TSLP-OX40L-Th2/TNF-α信号传导通路的影响

来源 :河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:saya1989
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目的:通过比较经方小青龙汤煎剂与小鼠OX40L单克隆抗体对哮喘炎症因子TNF-α及共刺激信号因子OX40L的影响,探讨小青龙汤煎剂对TSLP-OX40L-Th2/TNF-α信号传导通路的影响,从而进一步探讨小青龙汤对寒性哮喘的疗效机制,发现其作用靶点是否通过干预OX40L表达来实现。材料和方法:将50只SPF级健康雌性BALB/c小鼠(鼠龄6-8周,体重20-22g)按随机数字表法分为5组,即小青龙汤组(A组)、m OX40L阻滞剂组(B组)、抗体对照组(C组)、模型组(D组)和空白组(E组),每组10只。适应性喂养1周后,除空白组外,其余四组小鼠均采用OVA加Al(OH)3佐剂皮下及腹腔注射致敏,致敏后以OVA雾化吸入激发并空调强力冷风吹袭致寒的方法复制寒性哮喘小鼠模型。造模的同时,各组小鼠分别给予相应药物的干预,并于末次激发结束后12小时内麻醉、处死小鼠,按“取血、取肺组织”的顺序迅速采集标本。制备血清、组织匀浆液及肺组织病理切片,以ELISA法检测血清TNF-α,Western blot法检测肺组织TSLP,以及荧光免疫组化方法检测肺组织OX40L的表达。结果:(1)C、D组小鼠表现出来的哮喘症状和体征较A、B组显著,E组无显著症状;(2)病理切片HE染色显示C、D组支气管炎症细胞浸润及管腔变窄程度较A、B组明显,E组无明显炎症细胞及管腔变窄;(3)与E组对比,D组TNF-α、TSLP的水平均升高,两组间差异具有统计学意义(P<0.05);与D组对比,A、B组TNF-α、TSLP水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05);而A组与B组对比,差异不具有统计学意义(P>0.05);(4)荧光免疫组化检测显示肺组织OX40L表达水平:A组:“+++”,B组“+”,C组“+++++”,D组“+++++”,E组“-”。结论:本课题发现小青龙汤煎剂能够通过降低寒性哮喘小鼠肺组织中OX40L的表达水平,来调控TSLP-OX40L-Th2/TNF-α信号传导通路,进而降低肺组织中炎症细胞的浸润,所以小青龙汤煎剂治疗寒性哮喘的作用靶点可能是通过干预OX40L表达来实现的。
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