随着土壤盐渍化的增加,全球几亿公顷的土地受到盐渍化影响。因此,在盐碱地上种植作物的耐盐能力越来越重要。目前可以通过种植盐生植物来改良盐碱地,发展盐碱化农业,防止水土流失,当务之急应将盐生植物的耐盐机理及相关耐盐基因的功能研究透彻,这样不仅有利于盐生植物对盐碱地的改良,还能够通过转基因技术将耐盐基因转入非盐生植物中,从而增强其耐盐性。二色补血草作为向外泌盐的盐生植物,能够将过剩的盐离子通过表皮的盐腺结构排到体外,从而避免盐害。目前二色补血草盐腺发育分子机理的研究少之又少,通过前人的研究可知,在盐腺发育过程中存在大量与盐腺泌盐相关的基因。所以本文致力于与盐腺发育早期发育相关未知功能基因的研究,探究其相关表型及功能。根据本课题组对二色补血草盐腺发育早期的三代转录组测序结果,筛选得到在盐腺发育早期高表达的Lbsgd0089、Lbsgd0109和Lbsgd0119三个基因,并对其进行全长克隆和生物信息学分析,并且构建过量表达载体和敲除载体,侵染野生型拟南芥和二色补血草,并进行相关表型观察及功能分析;通过侵染烟草表皮细胞,进行瞬时表达,对三个基因编码的蛋白质亚细胞定位进行了分析。本论文的主要结果如下:（1）根据二色补血草三代转录组测序结果,筛选到了3个在stage A和stage B时期高表达的未知功能基因Lbsgd0089、Lbsgd0109和Lbsgd0119。通过对三个基因的全长克隆,在序列检测正确的情况下,对三个基因进行了生物信息学分析。Lbsgd0089基因的碱基序列具有1212 bp,编码403个氨基酸,根据blast结果显示同源性最高的物种是石榴,而且拥有DUF707超家族结构域,但功能未知。Lbsgd0109基因的碱基序列具有1260 bp,编码419个氨基酸,blast结果显示,二色补血草Lbsgd0109与猪笼草具有相对较高的同源性,且拥有DUF4409和DUF239两个未知功能结构域。Lbsgd0119基因具有516 bp的碱基序列,编码171个氨基酸,由系统进化树可知该基因与蝴蝶兰的组蛋白H1同源性最高,并且在跨膜结构域分析中发现有五个跨膜区,属于跨膜蛋白,可能与膜分子表面的信息传递有关。（2）将Lbsgd0089、Lbsgd0109和Lbsgd0119基因序列利用同源重组的方法与表达载体相连,得到的同源产物依次转化大肠杆菌和农杆菌,侵染野生型拟南芥,除草剂筛选直至T3代,利用荧光定量PCR进行相对表达量的分析。筛选得到Lbsgd0089的纯合过表株系分别是89-OE6、89-OE1和89-OE3,Lbsgd0109的纯合过表株系为109-OE4、109-OE8和109-OE2,Lbsgd0119的纯合过表株系为119-OE6、119-OE3和119-OE2,并分别利用三个基因的三个纯合过表株系进行表型观察和功能分析。（3）分别采用0和100 m M Na Cl处理野生型拟南芥、Lbsgd0089、Lbsgd0109和Lbsgd0119基因的各拟南芥过表株系种子。结果表明,随着盐浓度的升高,野生型、Lbsgd0089、Lbsgd0109和Lbsgd0119基因的各拟南芥过表株系种子总体出现发芽率降低、发芽指数降低以及子叶长出率降低等趋势。在相同的盐浓度下,各过表株系萌发参数显著低于野生型,但是不同过表达株系之间没有显著差异,说明三个基因在萌发阶段的负调控耐盐性。为了进一步探究Lbsgd0089、Lbsgd0109和Lbsgd0119基因在抗盐机理方面的作用,我们测定了各过表株系耐盐相关基因SOS1、HKT1、NHX1、P5CS1的表达量,从结果可知,三个基因的过表株系抗盐基因的表达量均低于野生型,进一步说明三个基因过表拟南芥后,其耐盐性显著降低,对植物的耐盐性具有负调控作用。（4）烟草表皮瞬时表达对Lbsgd0089、Lbsgd0109和Lbsgd0119基因进行亚细胞定位,发现Lbsgd0089在细胞核中表达,对此我们猜测该基因可能是一种转录因子或者与核糖体的某些功能有关;Lbsgd0109和Lbsgd0119在细胞质膜中表达,猜想其可能在受体识别和信号传导等方面发挥重要的作用。具体这三个基因在二色补血草中的发育过程中起到怎样的关键作用还需进一步探究。