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目的：已有研究表明，在胃癌中microRNA-148a（miR-148a）表达下调，而DNA甲基化转移酶1（DNMT1）过度表达，但是两者异常表达的机制以及是否有相互关系目前尚不明确。本研究是为了探索miR-148a和DNMT1在胃癌中异常表达的机制，并摸清两者之间的相互联系。方法：我们通过实时定量逆转录聚合酶链式反应（RT-qPCR）、甲基化特异性PCR（MS-PCR）和免疫印迹方法分别检测胃癌病例组织及细胞中miR-148a表达水平，miR-148a基因启动子区域CpG岛DNA甲基化水平和DNMT1蛋白表达水平。通过构建并转染miR-148a过表达质粒，DNMT1siRNA质粒、空白对照质粒以及用5-杂氮-2’-脱氧胞苷处理等方法构建相应的细胞系。通过细胞计数和流式细胞分析术检测细胞系增殖率和凋亡率。结果:1.在38例胃癌病例组织中，共有32(84%)例病例中肿瘤组织miR-148a表达水平低于对于正常胃黏膜组织，而肿瘤组织中MiR-148a总体表达水平显著低于对应正常组织(p<0.01,ΔCT分别为4.27±1.67和2.97±1.79)2.3种胃癌细胞系中miR-148a表达水平均显著低于正常胃黏膜细胞系GES-1(MGC-8030.19±0.03倍, p<0.01; SGC-79010.29±0.03倍, p<0.01，BGC-8230.37±0.03, p<0.01)。3.在38例胃癌病例标本中，26(68.4%)例病例标本肿瘤组织中出现明显甲基化条带，只有7(18.4%)例正常胃黏膜标本中出现明显甲基化条带，而在26例甲基化组中，肿瘤组织miR-148a表达水平显著高于12例非甲基化组（p<0.01）。4.胃癌细胞系分别经终浓度为5u/L和10u/L5-aza-dC处理72小时后，细胞系中miR-148a表达水平显著上升（分别为7.6±1.1倍，p<0.01和10.4±1.50倍，p<0.01)。在38例胃癌病例标本中，22(57.9%)例肿瘤组织中DNMT1蛋白高于对于正常胃黏膜，而在22例DNMT1蛋白高表达组中，miR-148a表达水平显著高于DNMT1非高表达组（p<0.05）。而SGC-7901,BGC-823,MGC-803三种胃癌细胞系中,DNMT1蛋白表达水平均高于正常胃黏膜细胞系GES-1。5.在胃癌细胞系中，DNMT1表达的下调导致miR-148a基因启动子区域CpG岛甲基化水平的下降，进而导致miR-148a表达水平的上升，达到6.胃癌细胞系中miR-148a的异位过度表达能够下调DNMT1蛋白的表达。7.两组胃癌细胞系分别通过MiR-148a质粒转染后，通过细胞计数发现实验组胃癌细胞增殖速率显著低于对照组。但是通过流式细胞分析术发现两组凋亡率无显著差别（BGC-823p=0.14；SGC-7901p=0.12)。结论:胃癌中DNMT1蛋白的过度表达导致miR-148a基因启动子区域CpG岛的超甲基化，进而导致miR-148a的沉默；而DNMT1蛋白为miR-148a下游直接靶点，受其负向调节，在胃癌中miR-148a的沉默能导致其对DNMT1蛋白抑制作用的减弱，进而导致DNMT1蛋白表达水平的进一步上升和miR-148a的进一步沉默。本研究证明胃癌中miR-148a的沉默和DNMT1蛋白的过度表达可能起相互促进作用的正反馈调节作用。此课题为更深入的了解miRNA在肿瘤中的作用机制以及胃癌的诊治提供了新的方向。