灵菌红素生物合成与分离纯化研究

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灵菌红素(Prodigiosins)是一类天然红色素家族的总称,许多微生物如放线菌(Streptomyces)和细菌(Serratia,Pseudomonas)在代谢过程中可以产生此类物质。研究发现,灵菌红素具有抗菌、免疫抑制和诱导肿瘤细胞凋亡等作用,因而引起人们广泛的关注。论文中以粘质沙雷氏菌(S.marcescens AB 90027)为出发菌株,采用传统物理化学[紫外诱变(LiCl)和微波诱变]诱变方法,筛选得到了遗传性状较稳定的高产菌株YW-1,生产灵菌红素的能力较原菌株有了很大的提高,摇瓶发酵产量为95±5 mg/L,比出发菌株(35±5mg/L)提高了近1.7倍。论文对YW-1发酵条件的研究发现,该菌株发酵产灵菌红素的机制不同于以往文献报道的其它灵菌红素产生菌。该菌合成灵菌红素是pH下降的过程,最适pH范围为5-7。而前人研究发现Serratia细胞合成灵菌红素是一个产酸即pH降低的过程,其变化一般在5.5~9.5,最适pH范围为8.5-9.0。通过摇瓶发酵培养基和发酵条件的优化,提高了灵菌红素的产量、产率,缩短了发酵周期,40h发酵过程灵菌红素产量可达到近700mg/L,为灵菌红素工业大规模生产奠定基础。利用硅胶柱层析分离方法,可大量处理样品并得到较高的纯度。分离得到的产物利用HPLC、UR、IR等方法进行了鉴定,确认产物为灵菌红素。对其不同存在状态下的稳定性研究发现,灵菌红素对温度稳定,对光敏感,且固态比液态稳定,固态避光条件下则稳定性最高。
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