【摘 要】
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根据胆碱酯酶对乙酰胆碱和丁酰胆碱的选择性水解作用可分为乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶.该实验运用改良的ELLMEN氏反应,建立针对乙酰胆碱酯酶抑制剂的高通量筛选方法.从2000
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根据胆碱酯酶对乙酰胆碱和丁酰胆碱的选择性水解作用可分为乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶.该实验运用改良的ELLMEN氏反应,建立针对乙酰胆碱酯酶抑制剂的高通量筛选方法.从2000余株放线菌中筛选出35株阳性菌株(对乙酰胆碱酯酶的抑制率大于5﹪),其中数株对乙酰胆碱酯酶具有选择性的抑制作用(对乙酰胆碱酯酶的抑制率大于丁酰胆碱酯酶).从中挑选11株阳性菌株进行固体发酵,不改变其发酵条件,目的是进行活性的重现性发酵.该实验运用多种不同碳源和氮源的培养基对阳性菌株的液体发酵条件进行了研究.发现阳性菌株的较佳生长条件,尤其对其代谢产物的活性与发酵时间的关系进行了较详细的研究.对培养基的优化进行的研究表明,(NH4)2SO4会抑制活性物质的产生.研究结果表明,目标菌株发酵物中的活性成份具有很好的酯溶性,且因为其分子量小,容易透过血脑屏障,作用于中枢胆碱能神经系统.该实验还须对活性物质进行进一步的纯化,取得活性物质的单体,进行结构与活性及其选择性抑制作用的研究,通过对其进行结构改造与修饰,提高其活性和对乙酰胆碱酯酶的选择性抑制作用.
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