与传统重组蛋白疫苗相比,被称作“第三代”疫苗的基因疫苗,在病毒抗原蛋白的基因序列公布后的数周内可完成快速研发和生产,同时其高度模拟病毒感染的细胞内抗原表达方式可以诱导体液免疫及细胞免疫来实现病毒的预防和治疗。基因疫苗中,DNA疫苗更是具有存储稳定的优点。然而,现有DNA疫苗的临床转化仍面临基因转染效率低和免疫原性低的技术挑战。为此,本论文提出一种利用超声波联合正电性微泡介导声致穿孔效应来实现DNA疫苗在体转染和免疫的新技术。考虑到超声和微泡是诱导细胞声致穿孔损伤发生的能量控制关键。本论文首先在体外细胞实验中利用绿色荧光蛋白报告基因转染效率对声致穿孔声压参数（0.13,0.28,0.43和0.58MPa）和微泡电荷属性（正电性和中性）进行了优化研究。随后进一步在小鼠后腿胫骨前肌进行了荧光素酶报告基因的在体转染,并对不同声压参数下不同时间点荧光素酶表达量进行了小动物成像和定量测量。最后我们依据乙型肝炎病毒表面抗原HBsAg的基因序列合成了乙肝DNA疫苗,检验了声致穿孔介导乙肝DNA疫苗在体诱导抗体生成和免疫细胞激活的可行性。本论文研究结果发现,声致穿孔基因转染后细胞绿色荧光蛋白报告基因转染效率随超声声压参数增加而增加,且阳离子微泡的基因转染效果要优于中性微泡。进一步发现,阳离子聚合物PEI压缩后的基因质粒,其细胞转染效率显著优于未压缩质粒。小鼠在体荧光素酶基因的表达效率,同样随超声压力的增加而增加。对在体基因表达的时间分布进行研究发现小鼠在转染一天后出现明显的荧光素酶表达,其表达量在第四天达到高峰,之后保持在一定水平缓慢降低,在30天观察期有检测到荧光素酶蛋白的表达。为声致穿孔诱导基因疫苗在体长时间有效性的表达提供证据。通过声致穿孔技术在体递送乙肝DNA疫苗质粒后,成功诱导了部分小鼠产生免疫应答,在血清中检测出HBsAg抗体产生,说明了声致穿孔介导DNA疫苗免疫的可行性。