集胞藻PCC6803中基因slr1393的研究

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蓝藻是一类能与植物一样进行产氧光合作用的原核生物。随着分子生物学和分子遗传学研究的发展,蓝藻分子生物学取得了许多成就。集胞藻(Synechocystis sp.PCC6803)是一种具有自然转化系统的单细胞蓝藻,它既能利用光能进行自养生长,也可利用葡萄糖进行异养生长,是光合作用分子生物学研究的重要模式生物。   本研究利用同源重组双交换将集胞藻PCC6803中的未知功能基因slr1393进行定向插入失活。PCR扩增蓝细菌集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC6803)中未知功能基因slr1393的保守结构域,进一步以pBluescriptSK(+)为载体将其克隆到大肠杆菌中,构建了pBlue-arm质粒。再将卡那霉素抗性基因插入,构建了携带选择性标记的卡那霉素抗性的pBlue-arm-Kan质粒。将该质粒转化野生型集胞藻6803细胞,获得了能在含卡那霉素的培养基上正常生长的slr1393基因插入失活突变株⊿slr1393。对该突变株基因组DNA进行PCR扩增检测,验证其基因结构的正确性。   从生长曲线、藻胆蛋白、叶绿素a含量、吸收光谱及荧光光谱、对光照强度响应等几个方面对突变株进行了研究。突变株生长速度较野生型慢,胞内叶绿素a含量比野生型降低明显,而其弱光利用效率、强光耐受度以及电子传递速率均增强。即基因slr1393的插入失活与叶绿素a的合成相关,引起了藻体光合系统的变化,激活了光保护系统。而其通过何种途径进行光保护有待进一步探究。
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