目的:构建高效率低毒性的基因载体是基因治疗成功的关键。本研究目的是设计一种以“零代聚酰胺-胺”为内核、聚谷氨酸接枝小分子PEI为侧链的共聚物G0-b-PLG-g-PEI(PGLP),并且评估该聚合物作为基因载体的理化性质和生物性能。方法:本文通过三光气法制得L-谷氨酸-γ-苄酯-N-羧酸酐(BLG-NCA),以PAMAM G0作引发剂引发BLG-NCA发生开环聚合反应,制得聚酰胺-胺-b-聚谷氨酸苄酯(G0-b-PBLG),以PEI 423为氨解剂对G0-b-PBLG进行氨解,制得三嵌段共聚物G0-b-PLG-g-PEI(PGLP),采用核磁共振氢谱(~1H NMR)对聚合物PGLP的结构进行表征。通过静电结合作用制备PGLP/DNA自组装基因传递系统,琼脂糖凝胶电泳实验考察PGLP对DNA的压缩能力和保护能力;动态光散射法测定PGLP/DNA复合物的粒径与电位;采用CCK-8试剂盒和溶血实验评估聚合物PGLP与PGLP/DNA复合物的安全性;流式细胞仪测定PGLP/DNA复合物的体外转染能力;共聚焦显微镜观察细胞对基因的摄取,以及DNA在细胞内的分布情况。结果:~1H NMR图谱证实PGLP合成成功。琼脂糖凝胶电泳实验证明PGLP/DNA复合物在质量比w/w≥0.3时,PGLP可以有效压缩包裹DNA,当w/w≥1,PGLP能够保护DNA免受血清酶的降解。纳米粒度分析仪检测到PGLP/DNA复合物纳米粒的粒径范围是105~200nm,电位在+10~+28mV之间。细胞毒性研究结果表明载体PGLP的细胞毒性显著低于PEI 25K,并且PGLP/DNA复合物具备一定的安全性。溶血试验表明PGLP/DNA复合物与红细胞具备良好的生物兼容性。体外细胞转染实验表明PGLP/DNA复合物的最佳转染比为w/w=8,在有血清和无血清两种条件下对多种细胞(HEK293T、Hela、Bel7402及原代大鼠主动脉平滑肌细胞RASMC)的转染效率均显著高于PEI 25K或Lipofectamin 2000的最优转染效率。PGLP/DNA复合物在最优转染比时表现的抗血清转染效果更强。结论:PGLP具有基因转染效率高、细胞毒性低和一定的抗血清转染能力,具备作为有效基因载体的潜能。