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目的:通过探讨不同剂量NaF诱导体外培养大鼠星形胶质细胞凋亡、细胞周期和5’-NT、SDH、ACP活性变化机制，为进一步研究氟的中枢毒性机制提供实验依据。
方法:(1)通过体外分离纯化培养星形胶质细胞的方法，获得纯度达98％以上的星形胶质细胞(特异性抗GFAP免疫化学鉴定)；(2)MTT法检测各代细胞对NaF毒性的敏感性；(3)显微镜观察法、MTT法、FCM确定NaF染毒剂量范围；(4)采用倒置显微镜观察和FCM检测的方法，观察不同时间点(12h、24h、48h、72h)不同浓度NaF诱导的细胞凋亡，FCM检测细胞周期构成比；(5)紫外分光光度计检测SDH、5’-NT、ACP活性。
结果:(1)星形胶质细胞传代数超过8代后对毒物的敏感性明显下降，故宜采用第8代以内细胞作NaF毒理学研究；(2)NaF抑制星形胶质细胞生长和诱导细胞凋亡：影响细胞周期构成比呈时效(P<0.01)和量效关系(P<0.05)：(3)倒置显微镜下观察，2mmol/L，及以上剂量处理细胞12h后，细胞逐渐由贴壁而脱落，呈明显的剂量和时间依赖性；吉姆．瑞氏染色后，可见细胞膜连接中断，胞浆空泡，细胞膜皱缩，出芽现象，核膜不规则，核的染色质呈现固缩，并在核膜上结成均质的致密小块，形成典型的结节状、串珠状或半月形廓，可见核小体，细胞呈现典型的凋亡形态特征，且凋亡细胞随剂量增加和时间延长而增多；(4)FCM分析细胞周期显示：各时间点处理细胞随染毒剂量加大和时间延长，subGl细胞逐渐增多(时效P<0.01；量效P<0.05)；1～5mmol/LNaF剂量范围内12h时间点细胞随剂量增加由GJM期阻滞(P<0.01)向S期阻滞(P<0.01)转变；作用时间超过12h，1～2mmol/L范围内也可诱导细胞由G<,2>/M阻滞(P<0.01)向S期阻滞(P<0.001)转变，且呈时间依赖性；增加剂量，则主要为subG<,1>细胞；(5)NaF抑制SDH(P<0.001)、ACP(P<0.001)活性，对5’-NT活性影响不明显(P>0.1)；5’-NT、SDH、ACP活性与subGl DNA相对含量呈显著负相关(SDH：r=-0.84148 P<0.02；ACP：r=-0.90416 P<0.01)。
结论:
(1)采用大鼠大脑皮质星形胶质细胞探讨NaF的毒性机制，宜选择传第8代以内细胞：本实验首次以体外培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞为研究模型，观察NaF对星形胶质细胞的毒性作用；
(2)NaF诱导星形胶质细胞凋亡的效应与剂量和时间有关；
(3)NaF可以抑制星形胶质细胞SDH、ACP活性，对5’-NT活性影响不明显；
(4)星形胶质细胞SDH、ACP活性与subG<,1> DNA相对含量显著负相关；
(5)NaF通过诱导星形胶质细胞从G<,2>/M期阻滞向S期阻滞转变启动凋亡。