抗Ⅰ型超敏反应天然药物体外细胞筛选模型的建立与应用

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:skt023
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目的:建立抗Ⅰ型超敏反应药物体外细胞筛选模型,用于天然药物Q不同提取物的抗Ⅰ型超敏反应作用筛选。针对筛选出的Q活性提取物,进一步探讨其对Th1/Th2平衡的影响。 方法:(1)应用MTT法检测阳性药色甘酸钠和天然药物Q对RBL-2H3细胞增殖和原代大鼠肥大细胞(RPMC)生长的影响,检测地塞米松和Q对小鼠脾细胞增殖的影响。(2)应用酶学法检测色甘酸钠和Q对RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒释放β-己糖胺酶的影响。(3)应用ELISA法检测Q3、Q4对致敏小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ的影响。 结果:(1)MTT法实验结果表明,阳性药色甘酸钠和Q在给药浓度范围为1~100μg/mL时,分别对RBL-2H3细胞增殖和原代大鼠肥大细胞(RPMC)生长有抑制作用,其抑制率均小于50%,初步确定此浓度范围可用于肥大细胞酶学实验。小鼠脾淋巴细胞增殖实验中,阳性药地塞米松和Q3、Q4在浓度范围为1~100μg/mL时对淋巴细胞增殖的抑制率均小于50%,此药物浓度范围可用于ELISA实验。(2)两个细胞模型(RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒反应模型)基本建立,阳性药色甘酸钠可抑制RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒释放β-己糖胺酶(与模型组比较,P<0.01)。(3)应用RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒反应模型筛选天然药物提取物Q1~Q4,得到可能具有抑制肥大细胞脱颗粒反应活性的提取物Q3、Q4。(4)ELISA实验中,Q3、Q4均可同时下调小鼠淋巴细胞因子IL-4和IFN-γ水平(与模型组比较,P<0.01),可能参与Thl/Th2平衡的调节。 结论:本课题实验探讨了不同来源肥大细胞(RBL-2H3细胞和RPMC)脱颗粒反应在抗I型过敏反应药物筛选方面的相似性,初步建立了两个抗Ⅰ型超敏反应药物体外细胞筛选模型,同时应用这些模型筛选天然药物Q的不同提取物Q1~Q4。Q3和Q4抑制RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒释放β-己糖胺酶,可能为Q植物抗Ⅰ型超敏反应活性部位。Q3和Q4抑制致敏小鼠分泌IL-4和IFN-γ,可能参与调节Th1/Th2平衡。
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