棘白菌素B(Echinocandin B,ECB)脱酰基酶是制备棘白菌素B母核(Echinocandin B Nucleus,ECBN)的关键酶。ECBN主要通过ECB脱酰基酶催化ECB获得。目前ECB脱酰基酶存在表达量低,催化效率不高等问题,无法满足工业化生产。本论文通过将实验室保藏的重组质粒pSET152-ecbD导入变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)TK24,并对介质催化ECB的工艺研究,主要研究结果如下:首先将重组质粒pSET152-ecbD通过E.coli ET12567/pUZ8002-链霉菌接合转移导入变铅青链霉菌中,菌落PCR检测阳性重组子,催化反应验证筛选得到产ECB脱酰基酶的重组菌变铅青链霉菌S.L152-1-6,粗酶液酶活是243 U/L,是前期构建的天蓝链霉菌重组菌表达酶活力的2.27倍。将重组质粒pUC19-ecb导入大肠杆菌E.coli BL21,初步探索ECB脱酰基酶在大肠中的表达,研究结果表明ECB脱酰基酶在大肠杆菌中实现可溶性表达,底物浓度0.2 g/L。反应10 h后,转化率为20.1%。研究了ECB脱酰基酶在助溶剂体系中生物转化ECB的过程,确定了甲醇为最佳助溶剂,研究结果表明,底物浓度为0.5 g/L,甲醇添加量为9%(v/v),pH 6.5,温度35℃,反应9 h,ECB转化率达到75.3%,是对照组的1.83倍。在反应体系中,底物浓度为0.7 g/L时,将会产生较强的底物抑制,使酶活力下降。为了解除底物ECB的抑制,对树脂原位吸附耦合催化过程进行了研究。从8种吸附树脂中筛选出吸附和解吸最佳的大孔树脂,进一步考察树脂对催化反应的影响,研究结果表明,确定最佳树脂HP20,底物浓度1.6 g/L,HP20树脂添加量为8 g/L(w/v),甲醇添加量8%(v/v),反应30 h后,转化率达到80.2%。