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天然细胞外基质（ECM）中广泛存在的天然高分子具有良好的生物相容性和生物降解性，有望成为代表组织工程与再生医学优点的支架材料。在这些天然高分子材料中，透明质酸（HA）作为滑液和ECM中一种丰富的糖胺聚糖（GAG）成分，扮演着多种生理角色，其制备的医疗用品也具有很多独特的优点。然而，由于天然HA生物机械性能缺乏，必须经交联、酯化等化学修饰作用提高其化学和机械性能，才能作为生物材料广泛使用。本研究旨在探明HA羟基交联及其衍生物的体外降解规律，并为今后进一步开发HA交联及酯化衍生物提供科学基础和实验依据。 1．粘度法测量HA分子量(MrHA)： 采用粘度法测量MrHA，使用多点法测得本研究使用的HA样品MrHA=2.547±0.135 MDa，并将多点法与一点法的测量值进行配对t检验，得到使用一点法测量MrHA及交联衍生物分子量（Mr）的最适HA溶液浓度为1.25×10-1g／L，可用于测量后续实验中交联HA流体的Mr。 2．HA羟基交联衍生物的制备： 使用二乙烯基砜（DVS）在碱性介质中以不同HA／DVS配比、不同温度及不同NaOH溶液浓度交联HA，分别得到性能变化很大的HA-DVS衍生物，包括HA-DVS凝胶、软凝胶和流体。使用1，3-双环氧丁二烯、1，2，7，8-双环氧辛二烯和双环氧二聚环戊二烯三种双环氧化合物（DEC）为交联剂，在碱性介质中改变碱的浓度以及DEC的种类，得到HA-DEC流体；并采用戊二醛（GTA）为交联剂，在酸性介质中使用丙酮作催化剂，改变丙酮的比例及酸性介质的浓度，得到HA-GTA流体。 通过测量HA-DVS凝胶、软凝胶的浸液粘度及三种交联剂制得交联HA流体的Mr，发现DVS、DEC及GTA这三种双功能分子均能使HA发生羟基交联，并得到以下规律：1) 交联剂加量增大，可缩短交联反应时间，增大HA的交联度，提高交联HA衍生物机械强度；2) 反应温度升高，可缩短交联反应时间，但在相当大的范围内不改变HA的交联度，温度过低或过天津医科大学硕士学位论文摘要高会使HA交联衍生物机械强度降低;3)碱性介质对DvS和DEC交联HA的催化作用和对HA的降解作用相互竞争，酸性介质对GTA交联HA的催化作用和对HA的降解作用相互竞争，介质浓度过高或过低均会使交联度降低，介质参与交联反应;4)丙酮可催化GTA对HA的交联;5)DVS的交联效果明显优于DEC和GTA，本研究采用的三种DEC和GTA的交联能力差异不大。 3.HA及其经基交联衍生物的降解: 将 HA依1 .25 xlo一19/L溶解于不同浓度酸、碱性介质中，发现1h内HA降解迅速，Mr。显著降低，但延长降解时间不导致MrHA的显著下降。HA在蒸馏水中24h即可溶解，溶解48h后MrHA未显著下降，可认为蒸馏水对HA的降解作用很弱。对HA一DVS凝胶密封保存，数月后部分凝胶形态改变为软凝胶或流体，将软凝胶或流体在蒸馏水中浸泡48h，测量流体溶解后的M:，发现凝胶在贮存条件下发生降解，但流体的Mr仍明显大于Mr。。HA一DEC及HA一GTA流体在一定交联反应时间后在蒸馏水中溶解48h，测其Mr均比HrRA显著增大，但随交联反应时间延长，在不同浓度反应介质中，流体的Mr或下降或波动，说明反应过程中交联和降解同时发生。 4.狱四丁基按盐[（e.H，）‘N一HA]的制备: 为进一步开发狱的交联及醋化衍生物，本课题探索了一种以HA和四丁基氯化钱[（c，H，）。Ncll为原料，利用很普及的磺酸基阳离子树脂进行二次离子交换，再将洗脱液冻干得到（C.Hg）。N一HA的方法，并比较了固、液态两种不同的（C。H，）.Ncl的制备效果及固态（c’H，）。Ncl在离子交换柱中及在烧杯中制备（C’H，）‘N一HA的制备效果。红外光谱检测发现三种方法均可制得（C‘H，）‘N一HA。