【摘 要】
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第一部分 恒河猴骨髓基质细胞体外诱导分化成神经干细胞的实验研究 目的 研究恒河猴骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)体外培养及诱导分化为神经干细胞和
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第一部分 恒河猴骨髓基质细胞体外诱导分化成神经干细胞的实验研究 目的 研究恒河猴骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)体外培养及诱导分化为神经干细胞和体外标记的可行性。 材料及方法 梯度密度离心法分离纯化恒河猴BMSCs。在体外应用神经干细胞培养基(本实验室调制,专利申请号:02134314.4)和细胞因子进行BMSCs向神经干细胞的诱导分化。应用BrdU进行体外标记,利用免疫细胞化学方法进行鉴定。 结果 恒河猴骨髓基质细胞(BMSCs)能在体外培养中增殖、分化为神经干细胞。具有克隆能力的骨髓基质细胞源性神经干细胞能表达特异性的神经巢蛋白(Nestin)和波形纤维蛋白(Vimentin),并能最终能分化为神经元样细胞和胶质细胞样细胞,免疫细胞化学检测可分别见有神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质源性纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性表达。在本实验条件下未发现维甲酸(RA)、表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨髓基质细胞源性神经干细胞的诱导分化具有明显影响作用。免疫细胞化学方法进行鉴定证实,骨髓基质细胞源性神经干细胞在体外被BrdU成功标记。结论 恒河猴BMSCs是具有较强的自我更新能力和多分化潜能的细胞,在一定条件下,可分化为神经干细胞后进一步分化为可表达神经系细胞(神经元和神经胶质细胞)抗原的细胞。BrdU标记BMSCs是一种简便有效的标记方法,可考虑选作移植细胞的示踪剂。BMSCs较容易进行取材、体外培养、扩增和分化,来源方便,可作为神经细胞的种子细胞。
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