论文部分内容阅读
目的:非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)发病率逐年升高,它可以发展成为肝纤维化、肝硬化等肝脏的终末期病变, 其发病机理尚不清楚,缺乏有效的治疗手段。本研究用高脂高胆固醇饮食诱发建立大鼠NASH模型,检测血清胰岛素、TNFα水平,肝组织匀浆MDA、SOD水平,并以胰岛素增敏剂进行干预治疗,以求阐明(1)NASH发病的各个阶段是否存在胰岛素抵抗;(2)TNFα及氧应激/脂质过氧化损伤是否在NASH发病的各个阶段发挥作用;(3)胰岛素增敏剂是否能影响这些因素进而影响NASH的形成。本研究的完成将有助于进一步认识NASH的发病机理和指导临床治疗。方法:50只SD大鼠正常喂养1周后,随机分为5组,对照组(n=10只)普通饲料喂养;模型I组(n=10只)及模型II组(n=10只)喂饲高脂饮食(标准饲料的基础上加13%猪油,2%胆固醇喂养),给药I组及给药II组分别在高脂喂饲4周及9周后给予吡格列酮10mg·kg-1·d-1灌胃。分别在9周末及14周末处死各组大鼠,常规制备血清、肝组织匀浆、肝组织切片。测体长、体重、肝脏湿重,并计算肝指数(肝湿重/体重×100%)及Lee,s指数(体重0.33/体长×1000)等体质指标;全自动生化分析仪测定空腹血糖(FBG)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)及血脂水平,铜染色法测定血清FFA水平,放免法测定胰岛素(FBI)水平,计算胰岛素敏感指数(ISI=1/FBG*FBI);酶法<WP=5>测定肝组织匀浆SOD及MDA水平;常规制备HE染色病理组织切片,由有经验的病理科医师盲法阅片作出诊断。结果:1.9周后模型组大鼠出现明显胰岛素抵抗及脂质代谢紊乱;血清TNFα水平较正常组明显升高;ALT、AST水平无明显增高;肝组织匀浆MDA水平升高,SOD水平与正常组比较无明显差异;肝组织出现轻至中度脂肪变及气球样变性;给药组大鼠胰岛素抵抗及脂质代谢紊乱有明显改善,血清TNFα、ALT、AST水平及肝组织匀浆MDA、SOD水平无明显变化,肝组织结构大致正常。2.14周后模型组大鼠胰岛素抵抗及脂质代谢紊乱程度较前无明显进展;血清TNFα水平较前无明显进展;血清ALT、AST水平较正常组明显增高;肝组织匀浆MDA水平明显升高,SOD水平明显降低;肝组织出现中-重度脂肪变及气球样变性,所有标本出现小叶内炎症细胞浸润和散在的点状坏死; 给药组大鼠胰岛素抵抗及脂质代谢紊乱有明显改善,血清ALT、AST水平明显降低,血清TNFα水平、肝组织匀浆MDA、SOD水平无明显变化,肝组织脂肪变及气球样变性程度明显减轻,但仍见明显小叶内炎细胞浸润。结论:1. 长期高脂高胆固醇饮食可建立大鼠NASH模型,模型大鼠肝脏病变呈现动态进展,存在明显病理分期;2. 胰岛素抵抗在肝组织发生脂肪变性的过程中起到关键作用,在脂肪变的肝组织病变进展发生炎性损伤的过程中不发挥主要作用;3.应用胰岛素增敏剂可改善肝组织脂肪变性,但不能减轻肝组织炎细胞浸润;4.氧应激/脂质过氧化可能在肝组织脂肪变性后进一步发生炎症反应的过程中发挥重要作用;5. TNFα可能通过介导炎症反应和诱导胰岛素抵抗在NASH的发病中发挥一定作用。