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目的探索高强度聚焦超声(High intensity focused ultrasound, HIFU)诱导阿苯达唑热敏脂质体(Thermosensitive liposomes loaded with albendazole, TSL-ABZ)杀伤包虫原头蚴的效果。利用HIFU的热效应来诱导热敏脂质体靶向释药,从而提高阿苯达唑的生物利用度,增强对包虫病的治疗效果。方法1.采用单因素实验,来确定阿苯达唑热敏脂质体的制备方法。通过考察有机溶剂种类及用量、合成磷脂间的比例、水合介质pH值、脂类与药物比例、水浴温度等因素,初步确定制剂处方和工艺条件。2.通过透射电镜、Nano ZS90Zetasizer粒径测量、傅里叶近红外光谱分析、热重分析、体外释放浓度测试等手段对该药物载体进行表征考察,以证明是否成功制备阿苯达唑热敏脂质体。3.观察阿苯达唑热敏脂质体对离体原头蚴的影响。在不同水浴温度下,将不同比例的阿苯达唑热敏脂质体加入含有原头蚴的囊液中,测定药物浓度及在制剂作用影响下原头蚴的活力。4.观察HIFU诱导阿苯达唑热敏脂质体对离体原头蚴的杀伤效果。在一定高强度超声剂量下,将不同比例的制剂药物加入原头蚴悬液中,在光镜下观察形态改变并计数其死亡率,HE染色、透射电镜观察原头蚴组织病理结构的变化,TUNEL荧光染色观察原头蚴核凋亡情况。结果1.实验筛选出最佳的制备处方为：在药脂比为1：40,DPPC:MPPC:DSPG:ABZ成分比为66：7：5：3,缓冲液pH值为5.3,超声时间为15 min,水浴温度为38℃条件下,热敏脂质体的平均包封率为78.7%,ABZ载药率为1.91%。2.透射电镜下空白热敏脂质体为环形空心结构,而阿苯达唑热敏脂质体呈黑色圆球状；粒径分析仪测定制备的TSL-ABZ的平均粒径为316 nm, PDI为0.533,Zeta电位为-9.84 mV；红外光谱测试表明药物与载体间未发生化学作用力,且药物ABZ的结构也未发生改变,并证明药物被包含在脂质体结构中；DSC曲线证实制备的脂质体具有热敏特性,其相变温度约为42.1℃。3.在水浴时间24 h,水浴温度为42℃时,TSL-ABZ 1000μl组能最大程度诱导原头蚴死亡,死亡率较其他组更高。4.经过温度测试后,选择达到相变温度的最适HIFU辐照剂量(75W12 s),各实验组原头蚴的死亡率呈现一定的增长趋势,尤以HIFU+TSL-ABZ 1000μl组为最高,形态学观察发现皮层破坏严重,钙颗粒消失,空泡化严重,头钩脱落,部分结构甚至消失。荧光染色可见大量凋亡的细胞核。结论1.通过本实验方法制备的热敏脂质体成功包裹了阿苯达唑标准品,脂质体的形貌规则且呈单分散状态。粒径也已达到纳米级,分散均一,制剂体系比较稳定。2.热敏性磷脂可以控制药物释放,可依据实验条件选择性的作用于实验对象。在室温和体温时,脂质体内的药物不释放,当温度超过相变辅料的熔点时,药物释放具有爆炸式的特点。3.阿苯达唑热敏脂质体在相变温度条件下释放药物,并对离体原头蚴有杀伤作用。4.HIFU可诱导阿苯达唑热敏脂质体释放,从而增强对离体原头蚴的杀伤效果。