甜瓜性别分化的生理生化特性研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 20次 | 上传用户:abc123student
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采用回交与自交相结合的方法,历经12代选育出了甜瓜雌雄异花同株和雄全同株近等基因系,以该近等基因系为材料,进行了甜瓜性型基因的RAPD标记、甜瓜花芽和性别分化的形态学观察、甜瓜性别分化的特异蛋白质研究和甜瓜性别分化及发育期间的内源激素和多胺含量的动态分析,结果如下:在优化了甜瓜RAPD反应体系各个条件的基础上,对甜瓜性型基因进行了RAPD标记,共运用了300条10碱基随机引物,其中288条引物有扩增产物,扩增率为96%。其中有9条引物能稳定重复2~3次,多态性条带为9条,但经反复筛选只有S152引物在甜瓜近等基因系间能重复多次并稳定标记出了约550kb的差异谱带,标记为S152550,经F2代分离群体315株单株检验,该标记与性型基因的重组率为11%。对甜瓜植株茎尖生长点和不同直径花芽显微结构观察,结果显示甜瓜性别分化先要经过一个两性期阶段,继而才分化出不同性别,而且雌、雄、两性幼花芽在两性期之前不存在明显的形态学上的差异;两性期之后,甜瓜雄蕊体积快速增大,雌花和两性花芽中心开始凹陷形成下位子房,此时是雌、雄蕊最早出现形态差异的时期,可鉴定雌、雄、两性花的性别;之后雌、雄蕊沿着不同的发育程序分化,直至形成成熟的性器官;在发育过程中,雌雄花从两性期到产生大小孢子所经历的时间不同,雌花较长,雄花较短。对甜瓜营养器官(叶子)和生殖器官(雌花、雄花和两性花)的蛋白质作SDS-PAGE比较,发现叶子具有花蕾所没有的30KD蛋白,同时27KD在叶子中大量表达,且雌雄异花同株和雄全同株的叶子在此蛋白表达上无差异;雌花、雄花和两性花中同时出现了约38KD的蛋白,含量相近,此蛋白在叶子中都不出现;25KD的蛋白质在雌花、两性花分化的6个典型时期都存在,而在雄花中都不存在,可能是雌蕊表达的“关键蛋白”;12KD的蛋白质在雄花和两性花中的不同时期均存在,可能是雄蕊程序表达的“关键蛋白”; 18KD蛋白只在雄花中表达和27KD表达含量比雌花、两性花多,比叶子中少,这可能和雄花的发育有关。对甜瓜不同发育时期的雌花、雄花和两性花以及雌雄异花同株和雄全同株叶子中的四种内源激素(GA3、ZT、IAA、ABA)和四种内源多胺(Put、Cad、Spd、Spm)含量的动态变化经HPLC测定。结果表明,GA3含量升高有助于雌花分化;较低的ZT和IAA含量有助于性器官的分化和发育; ABA对花器官的发育有一定的促进作用,且ABA含量可能是甜瓜不同性器官发育的诱导因子之一,较高的ABA含量促进雄蕊的产生。四种多胺都与甜瓜的性别分化和花芽发育有关,较高的Put、
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