【摘 要】
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目的探究分析α-倒捻子素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法建立大鼠脑缺血再灌注(MCAO)模型,验证造模成功后,将实验大鼠按照体重随机分为5组,分别为假手术组、模型组、α-倒捻子素低剂量组、α-倒捻子素中剂量组以及α-倒捻子素高剂量组。常规饲养14天后,检测各组实验大鼠神经行为学评分。随后采用断头法处死实验大鼠并取脑组织,去除脑干和小脑后,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色
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目的探究分析α-倒捻子素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法建立大鼠脑缺血再灌注(MCAO)模型,验证造模成功后,将实验大鼠按照体重随机分为5组,分别为假手术组、模型组、α-倒捻子素低剂量组、α-倒捻子素中剂量组以及α-倒捻子素高剂量组。常规饲养14天后,检测各组实验大鼠神经行为学评分。随后采用断头法处死实验大鼠并取脑组织,去除脑干和小脑后,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死面积;采用干燥称重法检测脑组织含水量;光学显微镜下观察大鼠脑组织缺血区细胞形态;荧光显微镜下观察各组大鼠脑组织缺血区存活神经元情况。采用试剂盒检测各组大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠脑组织中炎症因子含量。采用Western blot法检各组大鼠脑组织中核因子(NF)-κB信号通路相关蛋白及凋亡相关蛋白表达情况。结果(1)模型组神经行为学评分最高(P<0.05),α-倒捻子素高剂量组神经行为学评分明显低于α-倒捻子素低剂量组及α-倒捻子素中剂量组(P<0.05);(2)α-倒捻子素低、中、高剂量组脑梗死体积明显较模型组减小(P<0.05),α-倒捻子素高剂量组大鼠脑组织脑梗死体积也明显小于α-倒捻子素低剂量组及α-倒捻子素中剂量组大鼠(P<0.05);(3)与假手术组相比,其余各组大鼠脑组织含水量均明显较大(P<0.05),α-倒捻子素高剂量组大鼠脑组织含水量则明显小于α-倒捻子素低、中剂量组(P<0.05);(4)光镜下模型组大鼠脑组织缺血区细胞形态发生明显改变,细胞体积明显缩小,细胞核固缩明显,α-倒捻子素低、中、高剂量组大鼠脑组织缺血区细胞水肿状态均较模型组有所改善,α-倒捻子素高剂量组细胞肿胀程度缓解最为明显,细胞形态基本趋于正常;(5)模型组脑组织存活的神经元数量最少且明显少于假手术组及各α-倒捻子素组(P<0.05);α-倒捻子素高剂量组脑组织存活的神经元数量明显多于α-倒捻子素低、中剂量组(P<0.05);(6)模型组SOD活性明显低于、MDA含量明显高于α-倒捻子素低、中、高剂量组(P<0.05);(7)与模型组相比,α-倒捻子素低、中、高剂量组IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子水平明显降低(P<0.05),α-倒捻子素高剂量组IL-1β、IL-6的水平明显低于α-倒捻子素低、中剂量组(P<0.05);(8)与模型组相比,α-倒捻子素低、中、高剂量组中三种NF-κB信号通路相关蛋白p-NF-κB、Cyclin D1、c-Myc的表达量均明显降低(P<0.05),α-倒捻子素高剂量组Cyclin D1、c-Myc蛋白表达量则明显低于α-倒捻子素低、中剂量组(P<0.05);(9)与模型组相比,各组大鼠脑组织中三种凋亡相关蛋白Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9的表达量明显降低(P<0.05),而Bcl-2表达量明显升高(P<0.05)。结论α-倒捻子素可通过抗氧化、降低脑组织再灌注损伤后炎症反应、抑制NF-κB信号通路的激活、抑制线粒体凋亡信号通路介导的细胞凋亡效应,改善脑梗死面积,对大鼠脑缺血再灌注损伤起到保护作用。
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