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姜黄素(curcumin, Cur)是姜科植物姜黄(Curcuma longa L.)的主要活性成分,姜黄素可抑制肿瘤细胞的生长,且抗癌谱广,毒副作用小,是一种具有良好应用前景的抗癌药。但姜黄素不稳定,水溶性差,在机体内难吸收,口服生物利用度低,大部分以原形排出体外,临床应用存在诸多困难。近年来,纳米给药系统的研究取得很大进展。纳米给药系统通常是由天然或合成类高分子材料制成,具有增加药物吸收、控制药物释放,提高药物生物利用度,降低药物毒副作用及靶向性等特点[6-8]。特别是在解决水难溶性药物方面展示了独特的优势,为难溶性、大剂量药物注射给药提供了一种新的途径。但由于制备Nps的各种材料对最终制剂会产生较大毒性影响,需考虑载体材料的生物相容性、毒性等问题,优先使用低毒性、内源性或可生物降解的生理相容性的材料,如白蛋白、明胶、聚乳酸等,其中首选白蛋白。白蛋白为内源性物质,具有安全无毒、无免疫原性、可生物降解及生物相容性好等优点,是一种理想的靶向给药系统载体材料。本实验分别采用nab技术与去溶剂化法将姜黄素制成白蛋白纳米粒(Nab-Cur-BSA-Nps与Des-Cur-BSA-Nps),并对两者的体外释药特性与体内药代动力学特征进行了初步考察。第一部分Nab技术姜黄素白蛋白纳米给药系统的研究1.建立Ctw的UV含量测定方法,用紫外分光光度法建立了Nab-Cur-BSA-Nps包封率的测定方法,姜黄素在0.5～6.0mg·L-1范围内呈良好线性关系,其回归方程为A=0.1721C+0.0075(r=0.9999)。实验结果表明,采用紫外分光光度法测定Nab-Cur-BSA-Nps中Cur的含量,辅料不干扰制剂中Cur的测定,专属性强,方法简便、灵敏、可行。2.通过单因素考察油水比例,BSA浓度,Cur投药量对Nab-Cur-BSA-Nps包封率的影响,筛选出最优处方,制得Nab-Cur-BSA-Nps的优化工艺：油水比例为1：4,BSA的浓度为1%,Cur投药量为2.5mg。采用切割显微镜观察Nab-Cur-BSA-Nps的外观形态,激光粒径分析仪测量纳米粒粒径。冻干制备的Nab-Cur-BSA-Nps冻干粉为外观饱满、无塌陷的疏松多孔状固体,复溶后呈橘黄色有乳光的胶态溶液；冻干前的平均粒径为245.2nm,姜黄素白蛋白纳米混悬剂冻干粉复溶后平均粒径为240.3nm,姜黄素白蛋白纳米混悬剂形态圆整,粒径分布均匀,平均包封率为(42.39±0.91)%(n=3)。3.以Cur原料药为参比,采用透析袋扩散法考察Nab-Cur-BSA-Nps的体外释药行为,72h体外累计释药率为96%。建立了HPLC法测定大鼠血浆中、小鼠各组织中Cur的含量的方法学；以自制的姜黄素溶液(Cur-Sol)为对照,对Nab-Cur-BSA-Nps进行了体内药动学和组织分布动力学的研究。本课题成功制备了Nab-Cur-BSA-Nps,制备方法简便,重现性好,避免了大量表面活性剂的使用,明显提高了药物在肺、肝中的浓度,有望成为姜黄素的新型纳米给药系统制剂。第二部分去溶剂化法姜黄素白蛋白纳米给药系统的研究1.建立用紫外分光光度法测定Des-Cur-BSA-Nps包封率的测定方法,姜黄素在0.5～6.0mg·L-1范围内呈良好线性关系,其回归方程为A=0.1721C+0.0075(r=0.9999)。2.通过单因素考察BSA浓度,Cur投药量,戊二醛用量对Des-Cur-BSA-Nps包封率、粒径的影响,筛选出最佳工艺,制得Des-Cur-BSA-Nps的优化工艺：BSA的浓度为1%,Cur投药量为4mg,戊二醛用量为0.5%×50μL。按优化工艺制备所得Des-Cur-BSA-Nps平均包封率为(92.60±0.38)%(n=3)。采用激光粒径分析仪测定粒径,平均粒径316.6nm。加入蔗糖为冻干保护剂的姜黄素白蛋白纳米粒冻干粉为外观饱满、无塌陷的疏松多孔状固体,复溶后呈橘黄色有乳光的胶态溶液,粒径为314.6nm。3.以Cur原料药为参比,采用透析袋扩散法考察Des-Cur-BSA-Nps的体外释药行为,24h体外累计释药率达85%。采用HPLC法测定大鼠血浆中姜黄素的含量,并建立其方法学；以自制的姜黄素溶液(Cur-sol)为对照,以大鼠为研究对象,对Des-Cur-BSA-Nps进行了体内药代动力学的研究。本课题采用去溶剂化法制备的Des-Cur-BSA-NPs大大提高了Cur在水相中药物浓度。其粒径小,稳定性高,该制备方法为白蛋白纳米给药系统作为难溶性药物、尤其是抗肿瘤药物的载药途径提供了一个新的平台,有望成为姜黄素的新型纳米给药系统制剂。