【摘 要】
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目的本研究采用唇形科鼠尾草属植物丹参的主要提取物——丹参酮ⅡA (TanshinoneⅡA, TanⅡA)作用于体外培养的人卵巢浆液性囊腺癌细胞SKOV3,通过观察其对SKOV3细胞的生长抑制
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目的本研究采用唇形科鼠尾草属植物丹参的主要提取物——丹参酮ⅡA (TanshinoneⅡA, TanⅡA)作用于体外培养的人卵巢浆液性囊腺癌细胞SKOV3,通过观察其对SKOV3细胞的生长抑制和诱导凋亡作用及对Survivin与Smac/DIABLO基因及蛋白表达的影响,探讨其可能的作用机制,为应用于临床治疗卵巢癌提供一定的理论依据。方法①体外培养人卵巢浆液性囊腺癌细胞SKOV3,经TanⅡA作用后,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同药物浓度干预、同一浓度药物干预不同时间下的人卵巢浆液性囊腺癌细胞SKOV3的增殖情况,计算细胞抑制率；碘化丙锭(PI)染色法流式细胞术检测细胞周期分布及凋亡率；②RT-PCR检测不同药物浓度干预、同一浓度药物干预不同时间下的Survivin与Smac/DIABLO mRNA表达水平；③免疫荧光细胞化学检测Survivin蛋白及Smac/DIABLO蛋白的表达。结果①1.0-10.0μg/ml TanⅡA对人卵巢浆液性囊腺癌细胞SKOV3具有生长抑制作用,并呈现时间-剂量依赖性。实验组较对照组G1期细胞数量增多,而S期细胞数量减少(P<0.05), TanⅡA可将SKOV3细胞周期阻滞于G1期。②Survivin和Smac/DIABLO mRNA均可表达于人卵巢浆液性囊腺癌细胞SKOV3。随着TanⅡA药物干预浓度的增加和作用时间的延长,Survivin mRNA的表达明显下调(P<0.05),而Smac/DIABLO mRNA的表达明显上调(P<0.05),在同一实验干预条件下,Survivin和Smac/DIABLO mRNA的表达呈负相关。③Survivin蛋白及Smac/DIABLO蛋白均可表达于SKOV3细胞。Survivin蛋白表达呈不均匀颗粒状,散在分布于细胞质中,也可见于细胞核；Smac/DIABLO蛋白表达呈大小不等的颗粒状,主要定位于细胞质中。结论TanⅡA对人卵巢癌细胞SKOV3具有生长抑制,改变其细胞周期分布、诱导其凋亡作用,其抗肿瘤作用可能是通过抑制人卵巢浆液性囊腺癌细胞SKOV3 Survivin和促进Smac/DIABLO的表达而实现的。
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