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为确定石见穿总酚酸对肝纤维化大鼠的保护作用及其可能机制,本文通过对石见穿总酚酸(STPA)的体外抗氧化作用,及其对CCl4造成小鼠急性肝损伤的保护作用,和石见穿总酚酸对四氯化碳复合法诱导大鼠肝纤维化治疗效果进行评价。本论文分为3个部分:
(1)石见穿总酚酸体外抗氧化能力的测定
通过测定石见穿总酚酸清除DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基,以及螯合金属离子、抑制亚油酸过氧化能力,证实石见穿总酚酸具有较强的抗氧化作用。
(2)石见穿总酚酸对小鼠急性肝损伤的保护作用
小鼠预先用石见穿总酚酸灌胃后,通过腹腔注射0.2%CCl4(10 ml/kg体重,精制花生油稀释)造成的小鼠急性肝损伤,测定其对小鼠急性肝损伤的保护作用。结果表明石见穿总酚酸各剂量组(高剂量16.50 g/kg,中剂量5.50g/kg,低剂量1.82g/kg,折合生药量)均能抑制血清ALT和AST活性升高,并能降低肝脏比重,表明石见穿总酚酸对CCL4 所致小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用。
(3)石见穿总酚酸对大鼠肝纤维化的治疗作用及其机制研究
使用高脂饲料-CCL4-乙醇复合法复制大鼠肝纤维化模型,模型成功后对纤维化大鼠用石见穿总酚酸进行30天的治疗(高剂量组22.8 g/kg,中剂量组11.4 g/kg,低剂量组5.7g/kg)。造模期间、治疗过程中和治疗结束后不断观察石见穿总酚酸对肝纤维化大鼠基本生理情况及肝纤维化大鼠血清标志物透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP) 含量测定,并对肝脏病理切片进行观察研究。同时测定血清中谷丙转氨酶(GPT/ALT)和谷草转氨酶(GOT/AST))以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)的活性,测定丙二醛(MDA)含量,以及总抗氧化能力(T-AOC)的变化等指标。结果显示模型复制成功后血清中HA,LN,PIIINP含量大幅升高,ALT、AST活性增强,MDA含量明显升高,总抗氧化能力、GSH-PX和SOD活性大幅降低。石见穿总酚酸可以显著降低肝纤维化的血清学指标HA,LN,PIIINP,降低血清中ALT和AST活性;使纤维化大鼠血清中MDA含量明显降低,总抗氧化能力、GSH-PX和SOD活性明显升高。
结果表明,石见穿总酚酸能有效地保护四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤,对实验性大鼠肝纤维化具有确切的治疗作用。其作用机制可能与其清除病理状态下过量自由基,阻止脂质过氧化反应,降低炎症反应,进而保护肝细胞的完整性,减少细胞外基质形成或者促进细胞外基质降解来维持肝脏正常功能有关。