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本研究从基因治疗的角度,以抑癌基因PTEN为靶基因,应用脂质体介导的基因转染方法,将外源性人野生型的PTEN基因导入人乳腺癌细胞ZR-75-1中,观察该基因对乳腺癌细胞的增殖、细胞周期及凋亡的影响,旨在为乳腺癌的基因治疗提供实验依据并探讨PTEN在肿瘤的基因治疗方面的应用前景。
研究利用脂质体介导法将人野生型PTEN表达质粒和磷酸酶活性缺失型PTEN表达质粒分别转入内源性PTEN基因缺失的人乳腺癌细胞ZR-75-1中,荧光显微镜观察转染效果、荧光质粒共转染检测转染效率;MTT法检测质粒载体对细胞生长增殖的抑制效应;RT-PCR、Western-blot分析两种PTEN表达质粒载体对细胞PTEN基因mRNA及其产物蛋白表达的影响;Hoechst33258染色后荧光显微镜观察肿瘤细胞形态学的变化,PI染色后流式细胞仪分析检测细胞凋亡。