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杀鱼爱德华氏菌是影响全球海水养殖鱼类健康的重要细菌性病原菌。该菌为胞内寄生菌,传统灭活疫苗对预防出血性腹水病效果不佳。因此,基于病原致病机制指导下的新型疫苗设计是开发杀鱼爱德华氏菌疫苗的基础和前提。双组分系统被证实与杀鱼爱德华氏菌毒力关系密切,但实验室前期主要集中于EsrA-EsrB双组分系统的下游调控通路研究,对EsrA-EsrB上游调节网络研究较少。前期研究利用转座子插入测序技术筛选出39种esrB潜在调控因子,并推测MviN对esrBB的转录起激活作用。本研究验证了 MviN具有激活esrB转录的功能,MviN在早期和晚期生长阶段发挥不同的功能来调节esrB的表达。本研究检测了MviN对于调控杀鱼爱德华氏菌在宿主体内定植的影响,初步证实MviN通过调控EsrB来调节杀鱼爱德华氏菌的体内定植。大菱鲆红体虹彩病毒是我国大菱鲆养殖主要病毒性病原之一,目前尚无有效治疗手段。主要衣壳蛋白MCP是针对鱼用病毒疫苗开发的首选免疫保护性抗原,但基于MCP的疫苗设计主要集中于DNA疫苗和亚单位疫苗,二者均存在免疫原性弱的限制。实验室前期开发了杀鱼爱德华氏菌多位点缺失株WED,在大菱鲆预防免疫中保护效果显著。本实验室前期也基于费氏弧菌luxI/luxR系统,开发了具有细菌密度和铁离子密度响应的双调控系统IronQS,在WED中表达调控严密。在此基础之上,本研究以WED为细菌载体,构建了IronQS-mcp双诱导表达调控质粒,表达大菱鲆红体虹彩病毒MCP的载体疫苗WED/IronQS-mcp。该载体疫苗可引起血清总蛋白水平和特异性抗体水平持续递增,高效激活超氧化物歧化酶表达和Mx等免疫因子的转录,在大菱鲆体内长期存在并表达MCP。综上所述,本研究发现MviN是esrB的重要调节因子,有利于杀鱼爱德华氏菌在大菱鲆体内的定植,这有助于杀鱼爱德华氏菌esrB上游调控通路的完善。载体疫苗WED/IronQS-mcp可激活大菱鲆的体液免疫和细胞免疫,可长期提供保护性抗原,具有疫苗商业化开发潜力,这为病毒疫苗研发和多联苗的研发提供了新的思路。