【摘 要】
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MicroRNA(miRNA)是一类内源性的非编码核糖核酸分子。研究表明,miRNA可作为疾病的分型、诊断和预后的生物标志物。现有的miRNA检测方法主要有Northern blot,微阵列,PCR等,但
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MicroRNA(miRNA)是一类内源性的非编码核糖核酸分子。研究表明,miRNA可作为疾病的分型、诊断和预后的生物标志物。现有的miRNA检测方法主要有Northern blot,微阵列,PCR等,但是这些方法存在一定缺陷,如灵敏度低,操作繁琐,重复性差等。因此,需要发展一种稳定的,灵敏的,方便的miRNA检测方法。在本研究中,基于多组分核酸酶介导的错配催化发夹自组装(MNAzyme-CHA),构建了一种简单的表面等离子共振(SPR)生物传感器实现对miRNA的高灵敏、高特异性检测。游离的MNAzyme片段能同时识别靶物质形成稳定的有活性的MNAzyme,然后持续裂解发夹H0,产生大量单链DNA片段。该片段能够触发CHA反应,产生大量的H1-H2复合物。最终,H1-H2复合物和链霉亲合素结合到传感芯片表面,输出放大的SPR信号。构建的生物传感器检测限低至1 pM,检测范围为1 pM-100 nM,并具有较高的特异性。该传感器能够成功的检测总RNA标本中特定的miRNA分子。因此,本研究构建了一种简单稳定的传感策略,可用于快速灵敏的检测miRNA,并且在生物医学研究和早期临床诊断中具有很好的应用前景。
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