本文以花生粉和棉籽蛋白取代了原培养基中的黄豆饼粉,并采用响应面法对林肯霉素产生菌的发酵培养基进行优化。首先采用Plackett-Burman实验分析各因素的主效应,选出对响应值影响较大的3个因素,即花生粉、K2HP04和玉米浆。对这些因素做爬坡实验,确定三个重要因素的中心点浓度,并运用响应面分析法确定了这3个重要因素的最优水平,分别为熟花生粉18g／L、K2HP040.4g／L、玉米浆1.2g／L。采用优化后的培养基进行摇瓶发酵,林肯霉素摇瓶生物效价为4268μg／ml,比优化前提高了12-17%。最后分别比较优化前后培养基中金属离子和氨基酸含量的差别,可知金属离子和氨基酸对林肯霉素生物合成有较大贡献。使用紫外照射结合NTG处理的复合诱变处理,并选用具有糖苷结构的IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)和林肯霉素本身作为筛选因子,取得很好的结果,效价提高了12-30%。在发酵Oh添加0.02%的IPTG,使效价提高了10%左右。实验证明IPTG具有诱导作用,即诱导p-半乳糖苷酶将乳糖分解为半乳糖和葡萄糖,提供营养物质或者合成抗生素的前体。实验发现,乳糖和半乳糖对林肯霉素的生产具有积极意义,尤其是半乳糖,几乎在发酵任何时间段添加都有利于抗生素的合成。多次实验证实在发酵前期(0-48h)添加0.01%的半乳糖,效价可提高20%左右。通过对莽草酸途径的代谢流分析,找到途径中关键酶氨基苯甲酸合成酶的抑制剂三甲胺,通过三甲胺抑制氨基苯甲酸合成酶的活性,使代谢流更多地流向酪氨酸的合成方向。实验证明,在48h添加0.08%的三甲胺对林肯霉素的生物合成有积极的意义。使效价提高了20%左右。