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虽然早在19世纪末猫就作为实验用动物用于生物医学研究,制药业等研究领域,但关于检测实验用猫遗传质量的研究鲜有报道。建立相应的遗传检测方法,制定相关的地方标准,对于确保实验用猫的质量和实验数据准确性至关重要。但我国目前尚未出台检测实验用猫遗传质量的国家标准,各地方也没有成熟的实验用猫遗传质量地方标准。随着国内大专院校,药品生产企业以及检定机构对实验用猫使用量的增加,建立符合我国目前研究水平和应用要求的实验用猫遗传质量标准和遗传质量检测方法迫在眉睫。本研究建立了两种用于实验用猫的遗传质量检测方法:第一种是建立实验用猫STR遗传质量检测方法。通过检索GeneBank数据库以及参考相关文献,备选了74个微卫星位点。以琼脂糖凝胶电泳和STR扫描结果为依据逐步筛选扩增效果好且多态性高的微卫星位点,共得到41个微卫星位点。进而考虑到这些位点在染色体的分布情况,在猫的常染色体(除了A1、B1染色体)上适当选择了1~2个多态性位点。最终筛选出31个STR位点用于检测,并初步分析了三种实验用猫群体(暹罗猫、家猫、虎皮猫)的遗传结构。结果表明,暹罗猫、家猫和虎皮猫的平均杂合度分别为0.655、0.7516、0.5474,表明暹罗猫和虎皮猫的群内亲缘关系适中,且符合封闭群动物的遗传特征;家猫的群内遗传分化较远。除了虎皮猫在FCA736、FCA920、FCA987三个位点的PIC数值小于0.25外,本研究所选用的其他微卫星位点PIC数值均大于0.25,属于中度或高度多态性位点。暹罗猫、家猫、虎皮猫的平均多态性信息含量分别为0.6081、0.7174、0.4957,STR位点在三个群体中提供了高度丰富的遗传信息。三个猫群体在31个微卫星位点上的平均群间分化系数为0.167,即群体间的遗传变异占总遗传变异的16.7%,表明三个群体间存在较高的遗传分化。暹罗猫和虎皮猫的遗传距离为1.0415;虎皮猫和家猫遗传距离为0.8459;暹罗猫和家猫遗传距离为0.5202,亲缘关系较近。第二种是建立实验用猫SNP遗传质量检测方法。本实验根据340个SNP位点的碱基序列,并用Ensemble数据库检索SNP信息,经Beacon Designer 7软件设计分型引物后,最终获得78个具有RS号且符合PCR-HRM要求的候选SNP位点。然后,用候选的78个SNP位点对部分样品进行HRM基因分型,初步筛选到27个多态性良好且分型效果显著的SNP位点。用这些位点分析了三种实验用猫群体(暹罗猫、家猫、虎皮猫)的遗传结构。结果表明,本实验筛选的SNP位点PIC数值均小于0.5,都不属于高度多态性位点。暹罗猫、家猫、虎皮猫的平均多态信息含量依次为0.2901、0.3186、0.3345;而暹罗猫、家猫和虎皮猫的平均杂合度分别为0.3695,0.4083,0.4309。SNP位点在三个群体中提供了中度丰富的遗传信息,且每种猫的群内亲缘关系较近,趋于近交。该结果与STR所测结果趋势不一致,两种方法测得的研究结果是否具有相关性,有待进一步验证。暹罗猫和虎皮猫的遗传距离为0.2489;虎皮猫和家猫遗传距离为0.1223;暹罗猫和家猫遗传距离为0.0717。亲缘关系与STR结果相近,均为暹罗猫和虎皮猫的遗传距离最远,其次为家猫和虎皮猫的遗传距离,暹罗猫和家猫的遗传距离最近。SNP测得的结果比STR所得结果偏低可能是因为所筛选的SNP位点多态性不够丰富。综上,本研究成功筛选了31个微卫星位点和27个SNP位点,建立了猫群体遗传质量检测的STR和SNP方法;进一步利用这两种方法分析了暹罗猫、家猫、虎皮猫三种实验用猫的遗传结构和亲缘关系。研究结果为制定我国实验用猫的遗传质量控制标准提供了数据支撑。