多成分药物发挥药效是多种成分面对多个靶点的综合作用,天然多成分药物的多种成分代谢动态过程研究已经发展成为一个热点科研方向。目前单一成分代谢研究比较成熟,两种成分之间的代谢性相互作用也逐渐阐述清晰,但是将两种以上多成分作为整体研究代谢轮廓的方法还较少见,因此本课题组采用多成分序贯代谢研究方法。以川芎为载体,基于临床上川芎用于脑血管疾病的实践,开展多成分口服吸收前溶出至透过血脑屏障的全程分析。对传统中药较常用的散剂开展了吸收前溶出研究,对传统中药最常用的汤剂(水煎提取物)进行了序贯代谢方法研究,并利用大孔吸附树脂分离富集技术,切割制备不同多成分环境的川芎多成分段,通过对比分析,为天然多成分药物代谢整体研究提供新的思路和方法。1川芎散剂中成分吸收前体外溶出研究。本实验按照中国药典方法,选择桨法,以阿魏酸为指标,利用紫外分光光度法测定川芎散剂中总酚酸在五种介质(水,0.1 mol/L盐酸,pH 4.5的醋酸缓冲盐,pH 6.8的磷酸缓冲盐,pH 7.4的磷酸缓冲盐)中的累积溶出量,绘制溶出曲线,以相似因子法和威布尔模型评价。结果表明川芎散剂总酚酸在五种介质中的溶出量具有差异性。在水、0.1 mol/L盐酸,pH 4.5的醋酸缓冲盐,pH 6.8的磷酸缓冲盐溶出行为具有相似性且符合威布尔模型,在pH 7.4的磷酸缓冲盐中的溶出则发生突变,30 min即达最大累积溶出量。结论是川芎总酚酸在介质由酸性到中性再到碱性中溶出量逐渐增多且溶出时间缩短,在酸性和中性介质中溶出曲线相似,在碱性介质中溶出快而完全。2川芎水提液多成分HPLC-UV多成分同时检测下的序贯代谢研究。建立川芎水提液指纹图谱,对比分析多成分变化情况。实验方法包括含酶人工胃肠液的体外温孵模型、在体封闭肠环并行血液灌流模型和在体封闭肠环-腹主动脉采血模型。研究内容包括：①消化道物理环境代谢；②肠道菌群代谢；③肠壁代谢；④肝代谢研究。因四个过程在空间和时间上保持连续性,因此命名为“序贯代谢”。结果显示川芎水提液指纹图谱中监测到17个成分,其在胃肠道稳定性研究中均基本稳定,有5个成分被肠道菌代谢,7个成分被肝代谢,2个新成分是肠代谢产物,1个新成分是肝代谢产物。基于序贯代谢过程采用封闭肠环法,研究中药中多成分口服后各成分代谢轮廓是可行的,为中药的代谢研究提供理论及实验依据。3川芎水提液多成分吸收与序贯代谢成分定性研究。首先采用肠襻法通过LC/MS技术来研究川芎口服后多成分经消化液-肠代谢-肝代谢的过程,结果显示阿魏酸、洋川芎内酯J/N、洋川芎内酯I、3-羟基丁基苯酞和洋川芎内酯G在所有样品中均存在,说明其一直是原型吸收入血；洋川芎内酯A,M,H和Q被肝代谢。通过灌胃给药取脑脊液法探究川芎吸收入脑成分,仅洋川芎内酯Ⅰ被检测到,结合序贯代谢结果,说明洋川芎内酯Ⅰ从吸收进入机体一直以原型形式被吸收最后到达靶器官(脑组织)；建立了肠淋巴吸收模型,虽然没有检测到原型吸收成分,可能与剂型有关,也可能是川芎没有或者很少通过淋巴吸收,此模型可以为以后实验提供技术指导。4川芎水提液多成分分段切割制备及序贯代谢差异研究。采用植物化学手段将川芎多成分切割分段成含有成分数量较少的几个小段继续进行代谢实验,阐明各成分变化过程。通过树脂切割将川芎水提液多成分分为4段,最后选择HPD 100制备。将10%、30%、50%醇洗脱段进行序贯代谢。结果10%醇洗脱段没有检测到川芎成分。30%醇洗脱段含有阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、洋川芎内酯H、洋川芎内酯J/N和羟基丁基苯酞。阿魏酸可能在肝中被代谢掉,产生了一个新成分,这与水提液代谢有差异,洋川芎内酯H被肝代谢其他3种成分原型吸收此与水提液代谢一致。50%洗脱液含有洋川芎内酯Ⅰ、洋川芎内酯H、洋川芎内酯G和羟基丁基苯酞。洋川芎内酯H被代谢,其他3种成分均是原型吸收。与水提液中被肝代谢结果一致。5总结和讨论。分别对各部分实验结果进行分析总结,并阐明本论文创新点。(1)借鉴化药有关溶出的测定方法和评价手段描述川芎散剂总酚酸体外溶出情况为中药溶出度研究提供参考依据。(2)序贯代谢评价口服中药吸收代谢的多成分动态变化。同时考虑到多成分环境改变时某些成分代谢情况的变化,选择大孔树脂分段来实现,为中药多成分代谢研究提供参考方法。