不同类型的蛋白在材料表面的吸附力及其对干细胞分化影响的初探

来源 :重庆大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Lv619
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
组织工程材料包括三个基本要素:种子细胞(功能细胞)、支架材料(细胞载体)和生物活性分子(生长因子)。支架材料为种子细胞提供物理支撑并形成局部微环境。当支架材料植入到体内时,周围组织液中的蛋白质将首先吸附到支架表面,其次才发生细胞的粘附。因此,吸附的蛋白质层是细胞与材料相互作用的重要纽带。细胞一旦发生了特异性粘附,则会通过黏着斑和细胞骨架产生细胞牵拉力(CTF),并通过CTF向支架的传递去感知支架的力学性质。有研究表明,纤连蛋白在材料表面的蛋白吸附力(Fad)能够调控CTF向基底材料的传递进而调控干细胞对基底力学性质的响应。人体组织液中包含众多不同类型的蛋白质。认为,蛋白类型影响Fad大小以及Fad介导的CTF传递和干细胞分化。据此,本文以血液中最丰富的血清白蛋白(牛血清白蛋白,BSA)、重要的胞外基质蛋白Ⅰ型胶原(COL I)和纤连蛋白(FN)为模型蛋白,在构建Fad检测和调控平台的基础上,定量检测各模型蛋白的Fad大小;在此基础上,进一步以大鼠间充质干细胞(rMSCs)为模型细胞,研究COL I的Fad大小对CTF传递,进而对干细胞响应基底力学性质的影响。主要研究内容及结论如下:
  (1)首先构建了无应力松弛的高弹性模量和有应力松弛的低弹性模量聚二甲基硅氧烷基底(PDMS),分别记为CH3-10和CH3-100;然后采用氧表面等离子体技术在PDMS表面构建了富含-OH的自组装单分子层(SAMs),进而采用3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)对所得-OH表面进行改性,制备富含-NH2的SAMs。采用水接触角测定仪、X射线光电子能谱和原子力显微镜检测结果证明CH3-、OH-、NH2-SAMs已成功构建,为后续调控和检测BSA、COL I和FN的Fad大小奠定了平台基础。
  (2)采用平行板流动腔/微球技术定量测量了BSA、COL I和FN在OH-,NH2-和CH3-SAM表面的Fad。结果显示,BSA和FN的Fad呈现:-OH<-NH2<-CH3,而COL I则呈现-OH<-CH3<-NH2,表明表面化学可以调控蛋白的Fad。此外,在同一材料表面,Fad呈现:BSA<<FN<COL I,表明Fad具有明显的蛋白类型依赖性。
  (3)通过免疫荧光染色、基底变形观察、碱性磷酸酶染色和油红O染色等手段考查COL I的Fad对CTF传递及干细胞行为的影响。结果显示,COL I在OH和NH2表面的高Fad使CTF可有效传递到基底,干细胞因能够感知基底的力学性质,包括弹性模量和应力松弛而在高弹性模量的刚性表面和应力松弛的软表面都趋于成骨分化。这不同于以往报道的rMSCs在预吸附FN的OH表面的分化:由于FN在OH表面的Fad过低,阻断了CTF向基底的传递,使rMSCs不能感知基底的力学性质,从而在软硬基底上都趋于成脂分化。
  综上所述,本文通过定量检测不同类型蛋白质与基底间的Fad,发现了蛋白类型影响Fad大小,并且这不同的Fad会使CTF传递以及干细胞对基底力学性质的响应不同。这些发现不仅为验证Fad的重要性提供了更多的证据,而且为更全面地理解细胞-基底材料间的力传导机制并指导生物材料支架设计提供了新的策略。
其他文献
中国水印版画是一个值得研究的课题。一方面,它可以说是世界版画的起源,是最古老的版种。另一方面,它还是中国现代版画创作中最具有潜力和活力的版种,在中国现代版画创作中展现了惊人的活力。从新兴木刻运动时期至今,水印版画成为一种承载艺术家思想情感并富于民族审美趣味的艺术语言,它呈现出了植根传统又交融拓展的趋向。一方面体现为不同版种语言的融通和技术的精纯化,另一方面也体现为表现形式的多方位拓展。  本文选取
学位
本文的研究意图是在漫长的壁画艺术发展中,通过多角度研究承载壁画艺术的物质载体,进行比较,拓展,从而引导出真正的核心载体是非物质。是来源于物质世界,而超乎物质存在的精神力量使得从古至今的壁画艺术,无论经历怎样的时代和岁月的破坏,无论是何种程度的文明,都有着不能以高低来论证的壁画艺术的传承精髓。这是壁画艺术不息的发展中非物质的载体,承载着的是人类文明的意识和生命力。
学位
多酚是植物次生代谢产物,具有很强的生物活性及较低的生物毒性,但其水溶性低、稳定性差的缺点限制了其在功能性食品和医药领域的应用。由于功能性食品和医药对产品高安全性的要求,对多酚采用化学和酶法修饰,合成新型的多酚衍生物的方法并不适用于当前实际。而采用环糊精(CDs)与多酚形成包合物的方法来增加多酚的水溶性和稳定性是一条可行之路。目前仍缺乏多酚与CDs间互作的系统研究,有鉴于此,本研究拟选取一些生物活性
学位
苯二酚异构体(DHB)包括对苯二酚(HQ),邻苯二酚(CC)和间苯二酚(RS),它们分子结构相同,性质也非常相似,是许多工业生产的合成中间体或者生产原料,常存在于工业污水里并被排放到环境中,严重威胁人类的健康甚至生存。因此,苯二酚异构体的检测在环境监测和维护人类健康等领域具有十分重要的现实意义。本论文构建了基于功能化碳纳米复合材料的电化学传感器,为苯二酚异构体的分离检测提供了新的思路和方法。具体研
果实发育和成熟过程中需要复杂的生理生化机制来密切调控,生长素在调节细胞分裂和扩张、控制最终果实大小具有重要的作用。生长素通过转录调控生长素应答基因来调控植物的生长发育。本研究中通过对生长素响应因子ARF家族的研究来证明SlARF6A在番茄的生长和成熟过程中起着重要作用。  在之前的研究中SlARF6A影响番茄绿果颜色的深浅,推测SlARF6A与叶绿素的形成有关,在本研究中,进一步对番茄SlARF6
学位
三峡水库自2010年完成175m蓄水后,采用“冬蓄夏排”的水位调度模式,淹没了长江上游及其支流周边高程在145~175m之间的陆地生态系统,形成了面积达348.93km2、水位落差为30m的水库消落带。消落带是介于水生生态系统和陆地生态系统之间的重要生态界面,具有较高的生物多样性。本文以节肢动物为研究对象,对整个三峡水库及其典型区域的消落带进行了调查,从纵向、垂向和时间三个尺度上研究了消落带节肢动
钽和钛(合金)是目前临床应用最广泛的骨科材料。钽具有密度大、熔点高、价格贵等特点,而钛(合金)具有质轻、熔点低、易加工的特点,这导致钽植入体的成本和售价明显高于钛(合金)植入体。因此,系统地评估并比较钽和钛(合金)的促成骨能力将有助于指导临床上对植入材料的选择。尽管大量研究对钽和钛(合金)的体内外促成骨能力进行了比较,但由于所用钽和钛(合金)的表面拓扑结构或孔结构有明显差异,对表面化学也缺乏系统表
学位
论文所研究的两个靶蛋白均属于酪氨酸激酶受体,在结构和序列上具有极高的相似性。其中,VEGFR2为血管内皮生长因子受体2,是抑制肿瘤细胞增殖和转移的有效靶标。CSF1R为集落刺激因子1受体,是靶向巨噬细胞研究最成熟的靶点之一,在多种肿瘤中高表达。作用于这两个靶点能起到肿瘤抑制作用。且现已批准的酪氨酸激酶抑制剂为多靶点激酶抑制剂,虽然它们具有良好的治疗效果,但已知有严重的不良反应及毒副作用。所以,从具
农药被广泛用于农业中控制杂草和害虫,以提高粮食产量。但是农药的大量使用会通过各种方式造成非目标环境的污染,甚至给人类健康带来严重的威胁。传统的农药残留检测方法主要依靠高效果液相色谱、气相色谱等大型仪器,虽然该方法具有极高的灵敏度,但是其仪器庞大、设备昂贵、预处理过程繁琐等缺陷,大大限制了在实际检测中的应用。近年来,荧光光谱分析法因其具有操作简单、响应速度快、灵敏度高、成本低廉、准确可靠等优点在农药
生物可吸收支架是目前血管支架研究的热点之一,在完成扩张/支撑狭窄血管和局部血运重建后能在体内逐渐降解为无害的小分子,特别是聚合物因其良好的组织相容性和生物降解性能成为主要研究材料之一。但聚合物的支架丝较传统金属支架的厚,可显著影响植入部位的血流动力学,延迟内皮损伤后的修复进程。随着支架的降解也使其局部力学环境变化更加复杂,易产生新生动脉粥样硬化等晚期血管并发症。同时,由于支架植入和球囊扩张时引起的