论文部分内容阅读
中药成分复杂多样,含有很多活性物质,但活性物质往往含量较低,因此对有效成分绝对含量的测定一直以来是中药研究领域中的重点。定量核磁共振波谱法(qNMR)无需对照品,不破坏样品,对样品可同时完成定性定量分析,且快速准确,在中药有效成分的定量方面具有重要意义。本课题选择中药虎杖和板蓝根为研究对象,用qNMR同时测定虎杖中白藜芦醇和虎杖苷两种药效成分的含量以及板蓝根中药效成分表告依春的含量。1.建立了qNMR同时测定虎杖药材饮片及配方颗粒中两种有效成分白藜芦醇和虎杖苷含量的方法。样品以80%乙醇和丙酮两次超声提取后用qNMR方法测定含量。考察了样品预处理和qNMR实验条件对测定结果的影响,选择DMSO-D2O(10:1,V/V)为溶剂,以基准物质邻苯二甲酸氢钾标定的2,3,5-三碘苯甲酸为内标,采用5mmBBO探头,P1(脉冲宽度)=14.4μs,d1(脉冲延迟时间)=5s,NS(采样次数)=32。选择定量信号峰为6.390ppm(白藜芦醇：H-2,6,d,2H)和6.326ppm(虎杖苷：H-4,t,1H)。实验评价了方法的精密度(均小于0.6%)、线性(相关系数r均大于0.999)、检测限LOD(白藜芦醇和虎杖苷分别为0.23g/L,0.24g/L)和定量限LOQ(白藜芦醇和虎杖苷分别为0.69g/L和1.57g/L),包括样品提取过程的回收率(白藜芦醇为97.7%-103.5%,RSD=2.4%；虎杖苷为94.5%-99.2%,RSD=1.6%),显示出qNMR方法在中药无标样定量时的可靠性。实际测定4种虎杖样品中白藜芦醇含量为3.57～5.69mg/g；虎杖苷含量为12.73～24.07mg/g。与文献报道的虎杖药材中白藜芦醇和虎杖苷的含量基本一致。2.建立了qNMR测定板蓝根中有效成分表告依春含量的方法。样品用水两次超声提取,以乙酸乙酯萃取法对提取液进行净化,再用qNMR测定表告依春的含量。考察了样品预处理和qNMR实验条件对测定结果的影响,选用氘代氯仿(CDCl3)为溶剂,以基准物质邻苯二甲酸氢钾标定的吡嗪为内标,在P1=9.84μs,dl=5s,NS=16的NMR条件进行定量。实验对qNMR方法进行验证：精密度(小于0.6%)、线性(相关系数r大于0.99)、LOD=0.67g/L,LOQ=2.02g/L、提取后产物加样回收率为96.9%-102.9%, RSD<3%,显示出qNMR方法的准确性、包括样品预处理过程的表告依春回收率为36.5%-45.7%,RSD=8.92%,表明提取方法稳定,但提取率有待进一步研究改进。实际测定板蓝根药材中表告依春含量为0.58mg/g。与文献报道板蓝根药材中表告依春的含量一致,也符合中国药典表告依春含量不低于0.02%的要求。