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研究目的： 第一从临床观察何首乌汤剂对糖尿病性骨质疏松症患者的疗效分析。第二建立糖尿病性骨质疏松大鼠模型，从形态学、病理学、超微病理学、分子生物学四个层面观察糖尿病性大鼠骨的动态变化情况，了解何首乌对糖尿病性大鼠模型骨的形态及成分的影响。 研究方法： 实验一：随机选取临床50例糖尿病性骨质疏松患者，分为2组（A组基础治疗组B组何首乌组）每组25例患者，对A组行基础治疗结合胰岛素控制血糖治疗，B组在基础治疗和胰岛素控制血糖的基础上加用何首乌口服治疗。分别在第0周、4周、8周、12周观察其血清钙（S-Ca）、血清磷（S-P）、碱性磷酸酶、骨钙素、骨密度变化及临床VAS、QOL、SF-MPQ、麻木评分。 实验二：取100只大鼠,分空白对照组20只（A组）其余80只大鼠行STZ法8周后造成糖尿病性骨质疏松大鼠模型，选取成功成模大鼠60只随机分为3组：糖尿病组20只（B组）、胰岛素组20只（C组）、何首乌组20只（D组）。各组实验动物予以相应的干预后，分别于第0、8、12、16周检测：体重、血糖、糖化血红蛋白、血脂、骨密度、血清磷（S-P）、血清钙（S-Ca）、碱性磷酸酶、骨钙素；于第12、16周分批处死，检测HE染色、扫描电镜分析。 实验三：于第12、16周观察糖尿病SD大鼠BMP-2、TGF-β1、IGF-Ⅰ在大鼠骨组织中的免疫组化及Westernblot表达情况，并用不同软件对数据进行统计学分析。 研究结果： 实验一: 1、两组患者治疗前后VAS评分比较：B组（何首乌治疗组）患者治疗后VAS评分12周比治疗前0周及4周明显升高（P<0.05）；组间相比，B组（何首乌治疗组）在治疗后12周的VAS评分较A组（基础治疗组）明显升高（P<0.05）。 2、两组患者治疗前后QOL评分比较：B组（何首乌治疗组）患者治疗后12周QOL评分均较治疗前0周和4周明显升高（P<0.05）,A组（基础治疗组）QOL评分12周比0周差异有统计学意义（P<0.05）;组间相比，B组（何首乌治疗组）在治疗后12周的QOL评分较A组（基础治疗组）明显升高（P<0.05）。 3、两组患者治疗前后SF-MPQ评分比较：B组（何首乌治疗组）患者8周和12周与0周和4周相比SF-MPQ评分均显著降低，差异均具明显统计学差异（P<0.05），A组（基础治疗组）患者12周 SF-MPQ评分与0周相比和12周相比差异有统计学意义（P<0.05）；而组间比较，B组（何首乌治疗组）与A组（基础治疗组）相比较，SF-MPQ评分在12周后具有统计学差异（P<0.05），说明B组治疗对疼痛改善程度要优于A组。 4、两组患者在治疗前后末梢皮肤麻木的情况比较：B组（何首乌治疗组）患者8周、12周麻木程度与0周、4周相比均有显著性差异（P<0.05），A组（基础治疗组）患者12周麻木程度与0周相比和4周相比差异有统计学意义（P<0.05）；两组间比较，B组（何首乌治疗组）在治疗后12周的麻木评分较A组（基础治疗组）有显著性（P0.05）；两组患者血磷在治疗前及治疗后均正常，差异亦无统计学意义（P>0.05）；钙磷乘积:差异亦无统计学意义（P>0.05）。 8、血清AKP（碱性磷酸酶）：B组血清AKP（碱性磷酸酶）含量在第12周和8周与0周相比，差异有统计学意义（P<0.05）。A组血清AKP（碱性磷酸酶）在第12周与0周相比，差异有统计学意义（P<0.05）。其余各组无统计学意义。 9、血清BGP（骨钙素）：B组血清BGP含量在第12周和8周与0周相比，差异有统计学意义P<0.05。A组血清BGP含量在第12周与0周相比，差异有统计学意义P<0.05。其余各组无统计学意义。 10、骨密度测定：差异无统计学意义（P>0.05）。 实验二: 1、一般情况 1.1平均体重测量:在第16周糖尿病组B组与空白对照组A组、胰岛素组C组、何首乌组D组相比，差异有统计学意义（P<0.05）。 1.2血糖测量,在第8周糖尿病组（B组）、胰岛素组（C组）、何首乌组（D组）与空白对照组（A组）相比较，差异有统计学意义（P<0.05）。在第12、16周糖尿病组（B组）与空白对照组（A组）、胰岛素组（C组）、何首乌组（D组）相比较，差异有统计学意义（P<0.05）。 1.3糖化血红蛋白测定：第16周糖尿病组（B组）与空白对照组（A组）和何首乌组（D组）相比，差异有统计学意义（P<0.05）。组内比较糖尿病组（B组）第16周与0周相比，差异有统计学意义（P<0.05）。 2、血脂代谢情况 测定血清总胆固醇、甘油三脂、HDL-C和LDL第8周空白对照组与胰岛素组、何首乌组、糖尿病组比较，差异有统计学意义P<0.05；第12周空白对照组、何首乌组与糖尿病组比较，差异有统计学意义 P<0.05。第16周空白对照组、胰岛素组、何首乌组与糖尿病组比较，差异有统计学意义P<0.05。糖尿病组第16周与0周相比，差异有统计学意义P<0.05。 3、相关生化指标检测 血清Ca含量：第16周糖尿病组（B组）与胰岛素组（C组）、空白对照组（A组）和何首乌组（D组）比较，差异有统计学意义（P<0.05）；组间比较，糖尿病组（B组）第16周与0周比较，差异有统计学意义（P<0.05）。 血清P含量：在各个时间段组间和组内相比较均无明显统计学意义（P>0.05）。钙磷乘积：第16周糖尿病组与与空白对照组（A组）和何首乌组（D组）比较均降低有统计学意义（P<0.05）；而组间比较钙磷乘积糖尿病组第16周较第0周降低有统计学意义（P<0.05），其余各组间在各个时间段比较均无统计学意义（P>0.05）。 血AKP（碱性磷酸酶）含量变化：第8周空白对照组（A组）与糖尿病组（B组）、胰岛素组（C组）和何首乌组（D组）比较，差异有统计学意义（P<0.05）。而第16周糖尿病组（B组）与胰岛素组（C组）、空白对照组（A组）和何首乌组（D组）比较，差异有统计学意义（P<0.05）。糖尿病组（B组）第16周和12周与0周比较，差异有统计学意义（P<0.05） 血清BGP（骨钙素）含量变化：第8周空白对照组（A组）与糖尿病组（B组）、胰岛素组（C组）和何首乌组（D组）比较，差异有统计学意义（P<0.05）。而第16周糖尿病组（B组）与胰岛素组（C组）、空白对照组（A组）和何首乌组（D组）比较，差异有统计学意义（P<0.05）。糖尿病组（B组）、胰岛素组（C组）和何首乌组（D组）第8周与0周比较，差异有统计学意义（P<0.05），糖尿病组（B组）第16周与0周比较，差异有统计学意义（P<0.05）。 4、双能X线：腰椎、髋部骨密度测定，第8周空白对照组（A组）与糖尿病组（B组）、胰岛素组（C组）和何首乌组（D组）比较，差异有统计学意义（P<0.05）。糖尿病组（B组）第16周与0周比较，差异有统计学意义（P<0.05）。第16周糖尿病组（B组）与胰岛素组（C组）、空白对照组（A组）和何首乌组（D组）比较，差异有统计学意义（P<0.05）。糖尿病组（B组）、胰岛素组（C组）和何首乌组（D组）第8周与0周比较，差异有统计学意义（P<0.05）。 5、骨组织光镜观察：空白对照组：第12、16周：骨小梁均匀，骨细胞清晰，骨陷窝正常，骨细胞核规则，核排列靠陷窝中间（中央型）。糖尿病组第12周：骨细胞减少，可见骨细胞核固缩，骨小梁变细，排列稍紊乱，骨细胞核不规则，可见三角形、杆状、弯月行，核排列靠陷窝边缘（周围型）。第16周：骨细胞进一步减少，部分骨细胞核固缩，骨小梁变细，排列紊乱，骨细胞核不规则，有三角形、杆状、弯月行，核排列靠陷窝边缘（周围型）。胰岛素组第12周：骨细胞减少，骨细胞部分核固缩，较多空骨陷窝，周围的鞘增厚，骨小管减少且短，骨小梁稍变细，排列紊乱，骨细胞核不规则，有三角形、杆状、弯月行，核排列靠陷窝边缘（周围型）;第16周与空白对照组16周相似。何首乌组第12周：骨小梁均匀粗细相等，排列规则，骨细胞较清晰，骨陷窝数量正常，骨细胞核规则，核排列靠陷窝中间（中央型）；何首乌组：第16周同空白对照组16周。 6、电镜观察：空白对照组：第12周16周股骨颈的骨小梁均匀粗细相等，排列非常规则，骨小梁之间的间隙很小，表面光滑。糖尿病组：第12周大鼠股骨颈的骨密质较薄，骨小梁排列不规则且变细，骨小梁互相连接成疏松的立体网状结构有增多，较大的骨小梁之间的间隙，表面稍粗糙。第16周骨小梁表面的胶原纤维排列杂乱、松散，空骨陷窝数量逐渐增加，空骨陷窝周围的鞘增厚，骨小管变短且数量减少，表面粗糙。胰岛素治疗组与何首乌治疗组：第12周大鼠股骨颈的骨密质较薄，骨小梁排列不规则骨小梁互相连接成疏松的立体网状结构有增多，稍大的骨小梁之间的间隙，表面稍粗糙。胰岛素治疗组第16周大鼠股骨颈的骨密质变厚，骨小梁基本均匀粗细大致相等，排列基本规则，骨小梁的立体网状结构有增加，较大的骨小梁之间的间隙，表面较光滑。何首乌治疗组第16周与空白对照组相似。 实验三: 免疫组化和免疫印迹法实验结果显示糖尿病组16周 BMP-2、TGF-β1、IGF-Ⅰ含量明显低于其余各组有统计学意义（P<0.05）;第12周空白对照组与其余3组相比有统计学意义（P<0.05）;何首乌组BMP-2、TGF-β1、IGF-Ⅰ含量16周与12周相比升高，差异明显有统计学意义（P<0.O5）。 结论： 1、何首乌治疗糖尿病性骨质疏松患者,可以改善患者的临床症状。 2、何首乌对于糖尿病性骨质疏松症患者,可以使糖化血红蛋白稳定，BGP和AKP血中含量下降,并且没有明显副作用。 3、何首乌对DOP大鼠模型可以改善血糖、糖化血红蛋白 4、何首乌对DOP大鼠模型可以血钙恢复正常,稳定 AKP、BGP,使骨密度增加。 5、何首乌可以改善DOP大鼠模型紊乱的血脂。 6、糖尿病大鼠随着时间延长BMP-2、IGF-Ⅰ、TGF-β1的在骨中含量会下降。 7、何首乌和胰岛素均可以改善糖尿病大鼠的骨质中BMP-2、IGF-Ⅰ、TGF-β1的含量，促进骨形成，但何首乌结合胰岛素治疗的效果优于单纯胰岛素治疗。