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目的：探讨单纯性缺氧对新生大鼠海马组织神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响。
方法：将36只新生1d Wistar大鼠随机分为N组(正常对照组)、Q2组(缺氧2h组)、Q5组(缺氧5h组)，每组12只。1、原代培养：新生1天Wistar大鼠脑海马组织细胞在含有碱性成纤维生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和B27的无血清培养液中进行原代培养。2、单克隆培养：当原代培养克隆球直径约为200μm时，利用有限稀释法进行单细胞克隆培养。3、传代培养：单细胞克隆培养形成的克隆球直径约200μm时进行传代培养。4、神经干细胞鉴定：(1)巢蛋白(Nestin)和烟酸己可碱33342(Hoechst33342)免疫荧光染色：当第3代细胞大多数克隆球直径约为200μm时，部分克隆球进行巢蛋白(Nestin)和烟酸已可碱33342(Hoechst33342)免疫荧光染色。(2)诱导分化及染色：当第3代细胞大多数克隆球直径约为200μm时，部分克隆球在含10％胎牛血清的DMEM/F12培养基中诱导分化3d。诱导分化3d的细胞分别行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和烟酸已可碱33342(Hoechst33342)免疫荧光染色。5、统计分析：记录各组神经干细胞克隆球生长至直径达到200μm时所需时间；计数每100个有核细胞中NSE阳性的神经元的个数，计算每组神经干细胞向神经元分化的比率，进行统计学分析。
结果：1、神经干细胞的鉴定结果：单细胞克隆培养形成的克隆球表达Nestin，诱导分化3d后细胞表达NSE、GFAP。2、缺氧对神经干细胞增殖影响的结果：Q2组、N组、Q5组细胞原代培养克隆球直径达为200μm所需时间分别为：7d、、10d、13d。3、缺氧对神经干细胞分化影响的结果：Q2组、N组、Q5组神经干细胞分化为神经元的比例分别为22.57±4.08％、16.14±6.20％、10.86±2.54％。各组之间均存在显著差异，p<0.05。
结论：短时间缺氧可促进在体神经干细胞增殖及神经干细胞向神经元分化；长时间缺氧则抑制在体神经干细胞增殖及神经干细胞向神经元分化。